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为探讨GBP对金黄色葡萄球菌的抑制机理,本课题主要介绍了GBP的概况及相关抑菌剂抑菌机理的研究方法,探讨了GBP对金黄色葡萄球菌的抑制效果,并研究了GBP对金黄色葡萄球菌细胞壁、细胞膜和细胞内大分子的影响。实验结果如下:(1)为测定GBP对金黄色葡萄球菌的抑制效果及最小抑菌浓度,本试验采用不同浓度GBP处理金黄色葡萄球菌后抑菌圈直径的大小,来评价GBP对金黄色葡萄球菌的抑菌特性。通过不同浓度GBP处理金黄色葡萄球菌后菌落计数的方法,来评估GBP对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度。以及在金黄色葡萄球菌对数生长期加入不同浓度的GBP后,采用分光光度计来测定GBP对细菌生长曲线和抑菌效果的影响。实验结果表明:GBP可以有效地抑制金黄色葡萄球菌的生长;而且GBP对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度为50μg/ml,且随着GBP浓度的增大,抑菌效果越发明显;对数生长期加入最小抑菌浓度的GBP时,细菌生长曲线虽然受到抑制但不是特别明显,浓度达到2倍最小抑菌浓度后,生长曲线受到明显的抑制。(2)通过观察GBP对金黄色葡萄球菌细胞壁的影响,分光光度计的实验结果可以推测GBP能够破坏和讲解细菌细胞壁;200μg/ml GBP处理金黄色葡萄球菌不同时间后,通过原子力显微镜可以直观观察处理组及空白对照组的细胞形态,结果表明:GBP处理时间越长,其对金黄色葡萄球菌的形态学影响越明显,细胞正常的形态遭到破坏,细胞壁变得粗糙且有明显的塌陷和褶皱,甚至出现细胞的崩溃;不同浓度的GBP处理金黄色葡萄球菌不同时间后,分光光度计测定405 nm处的结果表明存在于细胞壁与细胞膜之间的碱性磷酸酶出现泄漏,泄漏量与GBP浓度和处理时间呈正相关,即GBP浓度越大、处理时间越长,其对金黄色葡萄球菌的细胞壁破坏也越强。以上结果说明,GBP可以影响金黄色葡萄球菌的细胞壁结构,造成其通透性增加,甚至出现细胞壁的破碎。(3)通过紫外分光光度计在不同波长下测定经不同浓度的GBP处理过的金黄色葡萄球菌菌液,结果表明:细胞膜上的β-半乳糖酶和细胞内的核酸、蛋白、还原糖出现泄漏,泄漏量随着GBP浓度的增加和处理时间的增加而增加。说明GBP能改变金黄色葡萄球菌的细胞膜结构,使细胞膜的通透性增加,使细胞膜上的物质或细胞内的部分物质能够泄漏到细胞外。细胞的正常生理活动因此受到干扰,细胞内外的渗透压失去平衡,进而细菌生长受到抑制,甚至出现死亡。(4)对金黄色葡萄球菌细胞内大分子的抑制实验结果表明,GBP可以抑制金黄色葡萄球菌细胞内呼吸链脱氢酶的活性,而且抑制了胞内DNA和蛋白质的生物合成,抑制效果随着GBP浓度和处理时间的增加而增强。凝胶阻滞实验结果表明,加入GBP的DNA,其电泳的迁移受到抑制,说明GBP可以结合到DNA上,浓度越大,结合力越强。GBP对金黄色葡萄球菌内生物大分子的影响,可导致细菌正常生长受到抑制,甚至出现死亡。