绿僵菌资源调查及黄绿绿僵菌高致病力菌株的筛选

来源 :华南农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:RSH1987
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本研究旨在调查国内外部分地区绿僵菌属(Metarhizium(Metsch)Sorokin)真菌资源,分离、鉴定黄绿绿僵菌菌株,利用红火蚁(Solenopsis invicta Buren)和散白蚁(Reticulitermes sp.)测定它们的致病能力,进而筛选出对红火蚁与白蚁高致病力菌株,研究了该菌株在不同培养基、不同温度条件下的生物学特性,并测定该菌株对两种试虫的致死中浓度LC50和致死中时间LT50。研究结果如下:   (1)2007年至2009年,从国外8个国家、国内22个地区的不同生境(森林、农田、城郊、河滩、盐碱地等)共采回土壤样品682份以及罹病昆虫46份,经分离培养得到绿僵菌菌株164株,经鉴定分属于5个种,分别为:黄绿绿僵菌(M.flavoviride);金龟子绿僵菌(M.anisopliae);翠绿绿僵菌(M.iadini);平沙绿僵菌(M.pingshanese);绿僵菌未知种(Metarhizium sp.)。   (2)通过目测的方法,最终选定12株在PDA培养基上长势良好、生长速率快、产孢较多的黄绿绿僵菌菌株,供致病力筛选用。该12株黄绿绿僵菌菌株分离自广西。筛选结果表明,1×107孢子/ml浓度的悬浮液处理红火蚁14天和白蚁7天后,大部分菌株均能引起试虫死亡,对红火蚁和白蚁最低的致死率分别为30.95%和35.96%;分离自广西百色玉米地的SM076菌株对两种试虫均具有高效稳定的致病力,对红火蚁和白蚁的校正死亡率分别为79.76%和89.89%。   (3)通过对菌株SM076各项培养特性的研究得出,温度和培养基条件对菌株SM076的生长均有一定影响。20℃-29℃为最适培养温度区,其中26℃为该菌株最佳培养温度;PDA和Czapek培养基都非常适合菌株产孢,同时在PDA培养基上该菌株生长速度最快。   (4)菌株SM076对红火蚁致病力测定表明,红火蚁大型工蚁对其致死敏感性高于红火蚁小型工蚁,处理后14天的LC50分别为9.25×104和1.01×106孢子/ml。在1×107孢子/ml浓度的菌液处理下,红火蚁大型工蚁和小型工蚁的LT50分别为7.88d和9.11d;在1×108孢子/ml浓度的菌液处理下,红火蚁大型工蚁和小型工蚁的LT50分别为6.14d和7.81d。此外,随着黄绿绿僵菌孢子悬浮液浓度的增加,红火蚁的死亡率升高,致病时间缩短,致死中时间降低。   (5)菌株SM076对白蚁致病力测定表明,白蚁低龄工蚁对其致死敏感性高于白蚁高龄工蚁。菌株SM076对低龄工蚁和高龄工蚁的LC50分别为4.10×105和1.14×106孢子/ml。在1×107孢子/ml浓度的菌液处理下,白蚁低龄工蚁和高龄工蚁的LT50分别为3.51d和4.01d;在1×108/孢子/ml浓度的菌液处理下,白蚁低龄工蚁和高龄工蚁的LT50分别为3.51d和4.01d,LT90分别为5.53d和5.75d。此外,可初步认为,随着黄绿绿僵菌孢子悬浮液浓度的增加,白蚁的死亡率升高,致病时间缩短,致死中时间降低。
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