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目的:研究胸腺五肽及其衍生肽在体外对不同细菌的杀菌活性,并了解胸腺五肽及其衍生肽的分子结构与杀菌活性的关系。方法:根据胸腺五肽的分子结构,我们分别设计合成了5种衍生肽如下:①模板胸腺五肽,氨基酸顺序为精氨酸(Arginine,R)-赖氨酸(Lysine,K)-天冬氨酸(Aspartic acid,D)-缬氨酸(Valine,V)-络氨酸(Tyrosine,Y)(RKDVY,以下简称RKD5);②衍生肽1,是将胸腺五肽中的一个酸性氨基酸-天冬氨酸(D)替换成中性氨基酸-天冬酰胺(Asparagine Asn,N),氨基酸顺序为精氨酸(R)-赖氨酸(K)-天冬酰胺(N)-缬氨酸(V)-络氨酸(Y)(RKNVY以下简称RKN5);③衍生肽2,是将胸腺五肽中的酸性氨基酸(D)替换成碱性氨基酸-赖氨酸(K),氨基酸顺序为精氨酸(R)-赖氨酸(K)-赖氨酸(K)-缬氨酸(V)-络氨酸(Y)(RKNVY,以下简称RKK5);④衍生肽3,是在胸腺五肽的氨基酸序列后加入一组胸腺五肽的氨基酸序列,氨基酸顺序为精氨酸(R)-赖氨酸(K)-天冬氨酸(D)-缬氨酸(V)-络氨酸(Y)-精氨酸(R)-赖氨酸(K)-天冬氨酸(D)-缬氨酸(V)-络氨酸(Y)(RKDVYRKDVY,以下简称RKD10);⑤衍生肽4,是在衍生肽3的氨基酸序列中加入2个脯氨酸(Proline,P),氨基酸顺序为精氨酸(R)-赖氨酸(K)-天冬氨酸(D)-缬氨酸(V)-络氨酸(Y)-脯氨酸(P)-络氨酸(Y)-缬氨酸(V)-天冬氨酸(D)-赖氨酸(K)-精氨酸(R)-脯氨酸(P)(RKDVYPYVDKRP,以下简称RKD12);⑥衍生肽5,是将衍生肽4修饰成环状,氨基酸顺序为精氨酸(R)-赖氨酸(K)-天冬氨酸(D)-缬氨酸(V)-络氨酸(Y)-脯氨酸(P)-络氨酸(Y)-缬氨酸(V)-天冬氨酸(D)-赖氨酸(K)-精氨酸(R)-脯氨酸(P)环(RKDVYPYVDKRP环,以下简称RKD12环)。采用琼脂铺板计数法测定衍生肽的杀菌活性。将不同浓度的6种肽分子分别与革兰氏阳性菌(G+)金黄色葡萄球菌、粪肠球菌、枯草杆菌和革兰氏阴性菌(G-)变形杆菌、大肠杆菌、绿脓杆菌在37℃的恒温水浴箱孵育2h,然后铺板并置于37℃恒温培养箱中培养18-24h,记录每一琼脂板上的菌落数(Colony-formingunits,CFU),并计算衍生肽作用后的杀菌率。结果:①胸腺五肽及其衍生肽RKD5、RKN5、RKK5对革兰氏阳性菌(G+)金黄色葡萄球菌、粪肠球菌和枯草杆菌有杀菌活性,其杀菌活性由强到弱依次为RKK5>RKN5>RKD5,对革兰氏阴性菌(G-)变形杆菌、大肠杆菌和绿脓杆菌也有杀菌活性,且RKK5、RKN5杀菌活性强于RKD5,RKK5与RKN5间的杀菌活性没有明显差别;②2种衍生肽RKD10、RKD12对革兰氏阳性菌(G+)金黄色葡萄球菌、粪肠球菌、枯草杆菌和革兰氏阴性菌(G-)变形杆菌、大肠杆菌和绿脓杆菌均有一定杀菌活性,其杀菌活性由强到弱依次为RKD12>RKD10;③衍生肽RKD12环对革兰氏阳性菌(G+)金黄色葡萄球菌、粪肠球菌、枯草杆菌和革兰氏阴性菌(G-)变形杆菌、大肠杆菌和绿脓杆菌没有明显的杀菌活性。结论:①胸腺五肽RKD5对临床常见的几种革兰氏阳性菌(G+)金黄色葡萄球菌、粪肠球菌、枯草杆菌和革兰氏阴性菌(G-)变形杆菌、大肠杆菌、绿脓杆菌均有一定的杀菌活性;②衍生肽RKN5、RKK5、RKD1o和RKD12对临床常见的几种革兰氏阳性菌(G+)金黄色葡萄球菌、粪肠球菌、枯草杆菌和革兰氏阴性菌(G-)变形杆菌、大肠杆菌、绿脓杆菌也有一定的杀菌活性,其中衍生肽RKN5和RKK5的杀菌活性比模板胸腺五肽RKD5的杀菌活性有明显提高,衍生肽RKD10和RKD12的杀菌活性比模板胸腺五肽的杀菌活性没有明显提高,衍生肽RKD12环对临床常见的几种革兰氏阳性菌(G+)金黄色葡萄球菌、粪肠球菌、枯草杆菌和革兰氏阴性菌(G-)变形杆菌、大肠杆菌、绿脓杆菌无杀菌活性;③胸腺五肽及其衍生肽的杀菌活性与其所带的净正电荷量有明显的关系,特别是G+菌,还可能与其两亲性以及疏水性、分子量、肽分子的空间结构以及细菌的细胞膜差异有关。