泥蚶凝集素的分离纯化、理化性质及血清的免疫因子研究

来源 :福建师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiaoxiao_666
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以10种人及动物血红细胞、8种单细胞藻类及10种微生物细胞或孢子,检测福建7种常见双壳类的血清及肌肉提取液的凝集活力。结果发现在同一种双壳类的血清及肌肉提取液中都含有凝集素,且二者间存在明显差异。初步推测,同一种双壳类的血清及肌肉提取液中所含凝集素的类型不同。综合贝类血清、肌肉提取液的凝集效果,选定家兔红细胞、紫球藻和啤酒酵母分别为最敏感的细胞。 以泥蚶为材料,经(40%-20%)硫酸铵分级反抽、Sephadex G-100分子筛层析、Sepharose 4B吸附层析从泥蚶血清中分离出泥蚶血清凝集素(TGL-h)。经(65%-45%)硫酸铵分级反抽、DEAE-Sepharose离子交换层析、Sephaeryl S-200-HR分子筛层析从泥蚶肌肉中分离出泥蚶肌肉凝集素(TGL-m)。测定TGL-h和TGL-m的分子量、含糖量、等电点、紫外吸收光谱、氨基酸组成。比较二者的细胞专一性、糖结合专一性、热稳定性、pH值及盐度、巯基乙醇、二价金属离子的影响结果。TGL-h和TGL-m都具有促进小鼠淋巴细胞转化以及不同的抑菌作用,但通过免疫双扩散反应发现,由二者分别制备的抗血清并不能与对方发生交叉沉淀反应,说明它们不具有同源性。 初步研究了泥蚶血细胞离体条件下的吞噬作用以及血清因子对其的影响。并测定经大肠杆菌注射以后,泥蚶血清中抗菌活力、溶菌活力、酚氧化酶、超氧化物歧化酶活性的变化。结果表明,适当的免疫刺激可提高泥蚶自身的抗病力。
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