论文部分内容阅读
目的：初步观察川芎嗪联合贝那普利对GK大鼠并发肾病的大鼠肾组织TGFβ1,MCP-1、TGFβ1 mRNA、PKC活性、PKCβ等表达水平的影响及其调控作用的可能机制；探讨DN病变程度与信号传导及细胞因子表达的关系,并进一步探讨探讨川芎嗪对糖尿病肾病肾小球硬化及肾间质纤维化的保护作用和防治机制,寻找早期治疗DN病变的中医药新方法。方法：将40只雄性GK大鼠随机分为模型组、贝那普利组、川芎嗪组、川芎嗪+贝那普利组；每组10只。模型组,按5ml·kg-1·d-1灌服生理盐水；贝那普利组,按1.6mg·kg-1·d-1灌服贝那普利悬液；川芎嗪组,按150mg·kg-1·d-1灌胃(其浓度为20mg/ml)；川芎嗪+贝那普利组；另设10只同周龄WISTER大鼠作为(空白对照组),共五组动物。川芎嗪按150mg·kg-1·d-1灌服,加灌贝那普利悬液(按1.6mg·kg-1·d-1)；共16周。实验第8周、第12周和第16周将大鼠放入代谢笼中,收集24h尿液,测定24h尿蛋白定量；治疗16周后,将大鼠用3%戊巴比妥钠腹腔麻醉后剖腹,摘取肾脏。反转录聚合酶链反应法(RT-PCR)测肾组织TGFβ1 mRNA含量,免疫组化检测肾脏MCP-1,TGFβ1和PKCβⅠ、PKCβⅡ的表达,并用[3H]PDBu结合法测定肾皮质的PKC的活性,同时测定各组大鼠体重、血糖、血脂、Scr、BUN及Ccr变化。结果：与其它组比较,模型组大鼠血糖明显增高(P<0.05),24h尿蛋白定量明显升高(P<0.05),24h尿蛋白等指标增加(P<0.05,或p<0.01)。免疫组化及RT-PCR显示模型组大鼠肾组织MCP-1、TGFβ1、TGFβ1 mRNA表达明显增加(P<0.05,或p<0.01)；模型组和治疗各组PKCm活性均较正常组明显升高(p<0.05),而PKCc活性较正常组明显降低(p<0.05)。治疗各组PKCm活性较模型组明显降低(p<0.05),PKCc活性较模型组明显升高(p<0.05)。治疗各组组间比较,PKCm活性和PKCc活性均无统计学差异(p>0.05)。模型组肾小球内PKCβⅠ表达明显高于正常组(P<0.01)：治疗组肾小球内PKCβⅠ表达明显低于DM组(P<0.01),治疗组组间肾小球内PKCβⅡ表达无明显差异(P>0.05)。结论：川芎嗪联合贝那普利能降低糖尿病血糖、TG和TC；下调肾组织TGFβ1、MCP-1、TGFβ1 mRNA表达水平,降低血清肌酐、尿素氮水平,提高内生肌酐清除率,减少尿白蛋白的排泄,改善肾组织炎症病变和抗凝作用,从而改善DN大鼠的肾功能。抑制肾皮质中PKC转位激活及PKCβⅠ、PKCβⅡ亚型的表达,抑制细胞外基质蓄积。川芎嗪联合贝那普利对实验性糖尿病大鼠具有肾保护作用,其作用机制与其抑制肾皮质PKC激活和抑制PKCβ亚型的表达和降低肾组织TGFβ1、MCP-1水平有关。