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原发性支气管肺癌是常见的恶性肿瘤,是威胁人类健康的重要疾病。尽管针对原发性支气管肺癌的手术、放疗、化疗、生物治疗等治疗手段已取得了长足发展,但肺癌的预后仍然十分恶劣,总的5年生存率仍仅为15%左右,这就要求肿瘤学家们努力去探索肺癌治疗的新途径、新方法。 热休克蛋白是细胞在生理状态下必需而在应激状态时表达增多的一类保护性蛋白质。这类蛋白质具有高度保守性,其生物学功能十分广泛,主要是以“分子伴侣”的身份参与维持细胞蛋白质空间构象,蛋白质新生多肽链的正确折叠,多蛋白复合物的组装、跨膜运输、转运,蛋白质降解等。大量研究表明,在肺癌细胞中,各种热休克蛋白均表达增多,在肺癌的发生发展、耐药、预后等方面发挥着重要作用。基于HSPs尤其是HSP70在肺癌中的重要作用,能否将HSP70视为一种有效治疗肺癌的生物靶标,目前尚缺乏全面系统的研究。 本研究拟通过确认HSP70在肺腺癌中的表达,采用反义寡核苷酸技术和转基因技术来探讨HSP70与肺癌的关系及HSP70对放线菌素D所致肺腺癌细胞凋亡的影响,以阐明HSP70在基因治疗肺腺癌中的潜在意义,以期为肺癌基因治疗新策略、新靶点的探索提供理论和实验依据。主要实验结果如下: 1)、热休克蛋白在肺癌细胞及组织中的表达研究。经RT-PCR和免疫印迹检测发现,在A549肺腺癌细胞和肺腺癌组织中,HSP70,HSP86和αB晶状体蛋白和mRNA水平均较WI-38人胚肺细胞及正常肺组织要高,其中以HSP70在蛋白水平和mRNA水平增多最为显著,其mRNA和蛋白表达量均约为正常组织或细胞的5倍以上。以上结果表明,在肺腺癌组织和细胞中,HSP70是表达最多的一种热休克蛋白。 2)、HSP70表达下调对放线菌素D诱导A549细胞增殖抑制与凋