1研究背景和目的早期食管鳞癌(Tis～T1NOM0)患者病变局限在粘膜和粘膜下层无淋巴结转移,术后治疗效果好,文献报道5年生存率在67%～92%。但因早期患者无特异症状,多数患者为普查发现,而临床首次诊断率仅2%4%。同时临床上发现部分早期癌患者术后很快发生远处器官转移和复发,但缺乏对大样本早期癌临床病理特征及远期随访观察研究。此外,早期食管癌分子机制尚不清楚,缺乏早期癌筛查的敏感指标和方法。本研究正是基于实验室1973～2013年所积累的34万例食管癌资料库,并结合已完成的全基因组关联分析技术(genome wide association study, GWAS)所发现的与生存相关的基因多态性(single nucleotide polymorphisms, SNP)变异位点,阐明早期食管鳞癌5年生存率及肿瘤长度、大体类型、肿瘤浸润程度等临床病理预后主要影响因素,探讨早期癌死亡原因,揭示SNP变异与各临床分期关系,为早期诊断提供敏感分子指标。2材料与方法2.1研究对象2.1.1早期食管鳞癌患者预后影响因素、死亡原因分析2387例早期食管鳞癌患者,均在1975～2012年间行手术治疗并经病理确诊为早期食管鳞癌。其中男性1325例(平均58.84±8.04岁),女性1062例(平均59.33±7.90岁),中位年龄都是59岁,男：女=1.3：1。2.1.2rsl位点变异与不同期别食管鳞癌关系3074例食管鳞癌患者,其中早期230例,中晚期2844例。男性1863例(平均60.51±9.04岁),女性1211例(平均61.35±9.16岁),男性中位年龄60岁,比女性小1岁。男：女=1.5：1。病例均来自实验室1973-2013年所积累的34万例食管癌资料库。2.2问卷调查、医院资料核实和生存随访采用入户问卷调查或电话随访方式,如实记录患者信息,并根据患者提供的治疗医院,完成治疗信息的补充核对。随访时间从手术当日算起,截止到2014年02月18日。2.3早期食管鳞癌的诊断标准内镜观察为浅表粘膜病变,如糜烂、斑块和粘膜粗糙等表现；活检及术后病理报告为食管鳞癌,浸润程度为原位癌、粘膜内、粘膜固有层或粘膜下层,无淋巴结转移同时无远处转移(即0期：Tis N0M0和I期：T1N0M0)。2.4血样采集、DNA提取和Taqman基因分型在患者知情同意情况下,签署知情同意书,每位患者采集5ml EDTA抗凝外周静脉血。采用Qiagen Flexi Gene DNA提取试剂盒提取出血细胞全基因组DNA。应用1aqman(?)基因分型分析技术,检测rsl位点基因型。2.5统计分析数据采用SPSS19.0进行统计学分析。采用x2检验分析计数资料；寿命表法计算生存率；Kaplan-Meier法做单因素分析,并用Log-rank检验分析不同组间的差异；并采用Cox风险回归模型分析患者预后的独立影响因素。检验水准：a=0.05。3结果3.1患者术后生存状况早期食管鳞癌患者术后1年、2年、3年、4年、5年、10年、20年生存率分别为：93%、88%、85%、82%、78%、65%、53%(术后时间越长,生存率越趋于稳定),平均生存期为5.70±4.26年,中位生存期为4.86年。3.2早期食管鳞癌患者临床病理表型与预后关系单因素分析显示,家族史、病理分期、浸润程度、分化程度、大体类型、肿瘤长度、肿瘤部位、高低发区、学历、发病年龄与早期食管鳞癌预后显著相关,差异有统计学意义(P均<0.05)。性别、职业、淋巴结切除数目、手术切口上下切缘等与预后相关性不显著,差异无统计学意义(P均>0.05)。将以上10个有意义的因素引入COX多因素分析,发病年龄、肿瘤长度、大体类型、肿瘤浸润程度是影响食管鳞癌患者生存期的独立因素(P均<0.05)。较小年龄相对于大年龄预后较好(<50y：HR=0.237,95%CI：0.15-0.38)；较小肿瘤长度相对于较大者预后较好(<1.5cm：HR=0.649,95%CI：0.49-0.86)；与糜烂型相比,斑块型预后较好(HR=0.599,95%CI：0.48-0.74)；浸润程度为粘膜层相对于粘膜下层预后较好(HR=0.529,95%CI：0.42-0.67)。3.3去世患者死亡原因分析526例去世的患者中,肿瘤原因去世418例(79.47%),非肿瘤原因去世108例(20.53%)。肿瘤原因包括癌细胞广泛转移(肺、肝、骨转移等),及肿瘤复发。非肿瘤原因包括吻合口瘘、肺部感染、心脑血管疾病等。患者年龄越大因非肿瘤原因去世的比例趋于升高(x2=18.881,P=2.89E-04),且≥70岁的患者因非肿瘤原因去世的比例较高(210.663,P=1.00E-03)；工人、干部等非农民因非肿瘤原因去世的比例比农民高(x2=4.697,P=3.00E-02)；去世时间在3年以内的患者,生存期越长,肿瘤原因去世的比例趋于升高(x2=36.408,P=6.07E-06),且2-3年时最为明显(x2=8.294,P=4.00E-03)；生存期在10年以上的患者,非肿瘤原因去世的患者比例明显增加,其中10～20年时更显著(x2=12.335,P=4.44E-04)。本研究中60例早期食管鳞癌患者在1年内去世,肿瘤、非肿瘤原因死亡的分别是42和18例。因肿瘤原因与非肿瘤原因死亡的患者相比生存期差异明显,前者生存期长于后者(分别为6.20、3.10月)。通过查找姚村食管癌医院2006-08年123例早期食管鳞癌病人的HE切片,发现3例已去世病人的HE切片中的微小血管中有癌栓存在,提示癌细胞血道转移可能是肿瘤短时间内远处转移并导致死亡的原因之一。3.4AAAAA基因rsl位点的基因多态性与食管鳞癌不同临床表型关系rsl基因型分布与性别、年龄、家族史、分化程度、T分期、N分期、肿瘤长度、大体类型均无显著相关性,差异无统计学意义(P均>0.05)。rsl基因型分布与各临床分期比较时,相关性显著,差异有统计学意义(χ2=9.703,P=0.046)。但三种基因型组间比较时,各基因型在早、中、晚各期别中的差异无统计学意义(P均>0.05)。4结论4.1早期食管鳞癌患者浸润程度越浅、大体类型为斑块型、肿瘤长度、发病年龄越小,其预后可能越好；4.2早期食管鳞癌患者术后短时间内死亡,特别是一年内因癌细胞快速广泛转移去世,提示对其治疗方式需要重新评估；4.3rsl位点变异与食管鳞癌早中晚分期相关性不显著,需探究对临床分期和预后更敏感指标。