背景:膀胱癌（Bladder Cancer,BCa）是一种常见的泌尿系统肿瘤,在生物学和临床上具有异质性。p53途径的缺陷导致膀胱癌的诊断和治疗困难以及不良的临床预后。母系胚胎亮氨酸拉链蛋白激酶（Maternal Embryonic Leucine Zipper Kinase,MELK）在人类多种肿瘤中过表达,且其高水平表达与侵袭性肿瘤和较差的生存率相关,表明该激酶是潜在的治疗靶标。MELK介导侵袭性肿瘤生长的机制未完全清楚,但已证实MELK抑制可导致共济失调性毛细血管扩张突变因子（Ataxia Telangiectasia-Mutated,ATM）和细胞周期检查点激酶2（Cell Cycle Checkpoint Kinase 2,CHK2）的连续磷酸化,并导致p53和p21上调。OTSSP167是靶向抑制MELK激酶活性的抑制剂,在多种恶性肿瘤中已观察到OTSSP167的强效抗肿瘤作用。目的:探讨MELK在膀胱癌中的临床意义、生物学功能、作用机制,评估OTSSP167在膀胱癌中的抗肿瘤潜力。方法:利用生物信息学方法分析MELK在膀胱癌中的表达,预测其分子机制。通过TCGA、GSE13507等数据库分析MELK对膀胱癌预后的影响,建立临床预测模型。采用RT-PCR、Western blot、免疫组化等方法检测MELK在膀胱癌中的表达水平。使用MTT实验、平板克隆实验、transwell迁移实验和流式细胞周期检测等实验在体外检测MELK及OTSSP167对膀胱癌增殖和迁移的影响。采用裸鼠荷瘤模型检测MELK及OTSSP167在体内对膀胱癌增殖的影响。RT-PCR、Western blot、免疫荧光及回复实验探究MELK调控膀胱癌生长的机制及OTSSP167对MELK的抑制作用。结果:MELK在膀胱癌中高表达,且与肿瘤进展及预后不良相关。体外细胞实验显示MELK敲低抑制膀胱癌细胞的增殖和迁移,反之过表达会促进膀胱癌细胞的增殖和迁移。细胞实验及裸鼠荷瘤实验显示MELK敲低可通过ATM/CHK2/p53途径诱导膀胱癌细胞在G1/S期阻滞,从而抑制其增殖。体外、体内实验证实OTSSP167在膀胱癌中的抗肿瘤潜力,且进一步证实MELK可通过ATM/CHK2/p53途径调控膀胱癌的生物学行为。回复实验显示OTSSP167可回复MELK过表达引起的膀胱癌生物学行为变化。结论:我们的研究结果证明,MELK高表达预示膀胱癌患者预后不良。体内、体外研究均表明,MELK敲减或OTSSP167对膀胱癌细胞增殖和迁移具有抑制作用。此外,MELK沉默可通过激活ATM/CHK2/p53通路诱导膀胱癌细胞G1/S期阻滞。OTSSP167在膀胱癌中具有潜在的抗肿瘤作用。