本文从传统中药鸡内金(Endothelium Corneum)中提取糖苷酶,选取分离介质对粗酶液进行了分离纯化,研究糖苷酶的基本酶学性质,考察了糖苷酶水解大豆异黄酮后活性物质的变化,并对水解条件进行了优化,进一步对糖苷酶的水解特性进行探讨。确定鸡内金糖苷酶的提取方法,选取DEAE-cellulose DE-52作为鸡内金糖苷酶分离纯化的介质,采用SDS-PAGE法测定了该酶的相对分子质量。经硅胶柱层析法对大豆异黄酮混合物进行分离纯化后,通过对大豆异黄酮各单体以及另外两种黄酮水解特点(淫羊藿和芦丁)的对比,对鸡内金糖苷酶专一性水解黄酮类化合物上的糖苷键进行了初步探讨。确定DEAE-cellulose DE-52分离纯化条件为：上样量3mL,洗脱速度1mL/min、洗脱液为pH7.0的NaCl-Tirs盐缓冲溶液,分为0M～0.20M5个NaCl梯度,共分离纯化出5个组分,经TLC检测后,确定组分5中含有糖苷酶。SDS-PAGE法测定糖苷酶的相对分子质量为66kDa,单因素试验确定了鸡内金糖苷酶水解大豆异黄酮的最适条件,并采用正交试验对水解条件进行了优化,优化的结果为：35℃, pH5.0,反应时间15h,加酶量为3500U/mL,底物浓度4mg/mL。经HPLC检测,最优条件下的转化率高达99%。利用硅胶柱层析法对大豆异黄酮混合物进行了分离纯化,确定的分离条件为：经二氯甲烷和乙酸乙酯的梯度洗脱,可以分离得到三种大豆异黄酮苷元异构体；经乙酸乙酯和乙酸乙酯：甲醇=50：1两个梯度洗脱后,可以分离得到4个大豆异黄酮组分。分离物的纯度均在90%以上。对分离出来的大豆异黄酮苷单体进行水解反应,水解率均为95%以上。结果表明：鸡内金糖苷酶能有效水解大豆异黄酮上的糖基,从而将结合型的大豆异黄酮糖苷转化成游离型的苷元,大提高了大豆异黄酮的生物活性。此外,通过对淫羊藿及芦丁水解情况的研究,可以推断鸡内金糖苷酶能专一性水解黄酮类化合物7-位上的葡萄糖基,但是否高度专一,还需进一步论证。