论文部分内容阅读
本研究主要探讨递增运动负荷训练对大鼠心房肌蛋白质组的影响,以筛选出心房肌组织中对运动应激具有重要意义的差异性表达的目标蛋白质,在蛋白质组学水平上研究运动性疲劳的发生、发展的规律。本研究运用蛋白质组学的理论与技术方法,将10只雄性SD大鼠,分为运动组(n=5)和对照组(n=5)。递增运动负荷训练7周,力竭运动后6小时,运动组和对照组同时麻醉处死。提取心房肌组织的全蛋白,依次对样品蛋白进行PH梯度-SDS双向凝胶电泳分离蛋白、改良考马氏亮蓝方法染色、基质辅助激光解吸离子化飞行时间串联质谱分析。测得运动组和对照组蛋白质斑点数目分别是354±40个和382±24个,匹配率分别为68.67%±9.87%和72.67%±8.62%,相关系数为0.71;共获得具有两倍以上差异性表达的蛋白质点104个;运动后上调两倍以上的蛋白质点66个,其中运动后上调五倍以上的蛋白质点18个,未见运动后新增的蛋白质点;运动后下调两倍以上的蛋白质点38个,其中运动后下调五倍以上的蛋白质点23个,运动后消失的蛋白质点7个。选择差异性表达五倍以上的蛋白质点为目标蛋白进行质谱分析,共鉴定出5个蛋白质点:运动后上调的蛋白质有心房型心肌肌球蛋白轻链-1、谷草转氨酶;运动后下调、“缺失”的蛋白质有α-心肌型肌球蛋白重链。实验结果表明,在运动应激状态下,大鼠心房肌蛋白质发生了明显的差异性表达,这些差异性表达的蛋白质点为进一步深入研究具有运动性疲劳特征的新的目标蛋白提供了充分的实验依据;运动应激条件下大鼠心房肌蛋白质的差异性表达与心肌组织的信号转导、能量代谢、物质代谢以及心肌功能的改变有关。2-DE图谱中,运动组表达量明显下调和消失的目标蛋白质,经质谱鉴定,与肌肉收缩、运动能力下降及运动性疲劳的发生有关;运动组表达量明显上调的目标蛋白质,与长期递增运动负荷训练对组织细胞的损伤有关。值得一提的是,通过蛋白质组学方法成功筛选出的心房型心肌肌球蛋白轻链-1、谷草转氨酶等蛋白质,对机体可能产生的负面影响,在运动医学领域中的研究尚未展开,为研究运动性心脏疲劳提供了新的思路。