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从假交替单胞菌Pseudoalteromonas carrageenovora中克隆表达的琼脂硫酸酯酶属于催化硫酸酯水解的保守家族,具有多种用途,能特异性的脱除琼脂上的硫酸基团。本研究首先对产琼脂硫酸酯酶的重组大肠杆菌的诱导条件进行摇瓶单因素优化,并依据摇瓶优化结果进行5 L、20 L、200 L发酵罐的中试放大试验。其次,利用喷雾干燥法制备琼脂硫酸酯酶固体酶制剂,并对酶制剂的贮藏稳定性进行研究,找到最佳的贮藏方法。最后,利用纤维素酶和琼脂硫酸酯酶进行琼脂提取研究,并对复合酶提取琼脂的过程进行工艺设计。本试验以实验室克隆表达的产琼脂硫酸酯酶的重组大肠杆菌(E.coli-ars)为研究对象,首先在摇瓶中对其诱导条件进行单因素优化,得到最佳的条件为:诱导温度21℃,诱导时间24 h,诱导剂α-乳糖4 g/L,诱导初始菌浓(OD600)0.6;然后在5 L罐中对菌株进行发酵,在发酵过程中进行补料试验,结果表明补料提高了生物量,但是对酶活力没有促进效果。最后在摇瓶及5 L罐发酵基础上,分别进行20 L和200 L发酵罐的中试放大实验,结果表明,20 L罐中最大酶活力为157.5 U/mL,200 L罐中的最大酶活力为110.4 U/mL。利用喷雾干燥法制备固体酶制剂,以酶活回收率作为作为主要指标,得到最佳喷雾干燥条件:助干剂麦芽糊精含量25%,进风温度130℃,进风量3.5 m3/min,进料速度400 mL/h,喷雾压力0.25 Mpa。获得最高的酶活回收率为52.2%,相比于优化前(26.7%)提高了48.7%。对酶制剂的贮藏稳定性进行研究,实验结果表明温度、空气、光照、湿度都对琼脂硫酸酯酶制剂的贮藏的稳定性影响较大,根据以上实验结果,建议琼脂硫酸酯酶固体酶制剂在4℃、封口、避光、干燥条件下贮藏。通过单因素实验对酶法提取琼脂工艺中纤维素酶的影响因素进行探讨,得到了最佳提取条件为:酶处理温度50℃,酶处理时间2 h,酶加入量7200 U,料水比为1:20。在此基础上,对小试优化工艺进行验证,所提琼脂的得率为14%。此外,对琼脂提取工艺进行200L放大试验,结果表明酶法提取工艺具有良好地重现性与稳定性。在前期实验室小试和中试试验的基础上,初步设计年产300吨琼脂的生产车间。并对整个生产车间进行物料衡算、设备选型、经济效益估算。