琼脂硫酸酯酶发酵生产及酶法提取琼脂的应用技术

来源 :集美大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kissall
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
从假交替单胞菌Pseudoalteromonas carrageenovora中克隆表达的琼脂硫酸酯酶属于催化硫酸酯水解的保守家族,具有多种用途,能特异性的脱除琼脂上的硫酸基团。本研究首先对产琼脂硫酸酯酶的重组大肠杆菌的诱导条件进行摇瓶单因素优化,并依据摇瓶优化结果进行5 L、20 L、200 L发酵罐的中试放大试验。其次,利用喷雾干燥法制备琼脂硫酸酯酶固体酶制剂,并对酶制剂的贮藏稳定性进行研究,找到最佳的贮藏方法。最后,利用纤维素酶和琼脂硫酸酯酶进行琼脂提取研究,并对复合酶提取琼脂的过程进行工艺设计。本试验以实验室克隆表达的产琼脂硫酸酯酶的重组大肠杆菌(E.coli-ars)为研究对象,首先在摇瓶中对其诱导条件进行单因素优化,得到最佳的条件为:诱导温度21℃,诱导时间24 h,诱导剂α-乳糖4 g/L,诱导初始菌浓(OD600)0.6;然后在5 L罐中对菌株进行发酵,在发酵过程中进行补料试验,结果表明补料提高了生物量,但是对酶活力没有促进效果。最后在摇瓶及5 L罐发酵基础上,分别进行20 L和200 L发酵罐的中试放大实验,结果表明,20 L罐中最大酶活力为157.5 U/mL,200 L罐中的最大酶活力为110.4 U/mL。利用喷雾干燥法制备固体酶制剂,以酶活回收率作为作为主要指标,得到最佳喷雾干燥条件:助干剂麦芽糊精含量25%,进风温度130℃,进风量3.5 m3/min,进料速度400 mL/h,喷雾压力0.25 Mpa。获得最高的酶活回收率为52.2%,相比于优化前(26.7%)提高了48.7%。对酶制剂的贮藏稳定性进行研究,实验结果表明温度、空气、光照、湿度都对琼脂硫酸酯酶制剂的贮藏的稳定性影响较大,根据以上实验结果,建议琼脂硫酸酯酶固体酶制剂在4℃、封口、避光、干燥条件下贮藏。通过单因素实验对酶法提取琼脂工艺中纤维素酶的影响因素进行探讨,得到了最佳提取条件为:酶处理温度50℃,酶处理时间2 h,酶加入量7200 U,料水比为1:20。在此基础上,对小试优化工艺进行验证,所提琼脂的得率为14%。此外,对琼脂提取工艺进行200L放大试验,结果表明酶法提取工艺具有良好地重现性与稳定性。在前期实验室小试和中试试验的基础上,初步设计年产300吨琼脂的生产车间。并对整个生产车间进行物料衡算、设备选型、经济效益估算。
其他文献
修改后的刑事诉讼法首次以法律的形式规定了警察出庭作证制度。由于警察出庭作证在我国尚属新生事物,在实践中也没有相关经验和司法解释可以参考,因此大多数警察从心理上并未完
进入新时代,基层供电企业要实现持续科学健康发展,必须加强党的建设,以党建工作为引领,打造高素质党员干部队伍。基于此,国网临朐县供电公司立足企业实际,创新党建工作方法,
随着我国经济水平的不断上升,经济体制的不断变化,工商管理工作开展的重要性以及必要性越来越明显。在经济管理以及企业管理的稳定开展中均起了不可或缺的作用。众多研究学者对
随着经济社会的持续快速发展,市场竞争激烈程度日益加剧,使现代企业生产经营管理面临着更为复杂的严峻形势。如何通过强化企业财务管理和内部控制,优化企业内部管理成效,适应时代
Arthur Miller is one of the representatives of American playwrights in 1940 s. Miller’s contribution to modern drama lies in making a good expression of the co
期刊
2018年,完成41个贫困村、25个深度贫困村电网改造任务。驻马店市贫困村户均配变容量提升至1.5kVA。2017、2018年两年,共承担易地扶贫安置区配套电网项目18个,满足2014户搬迁
绥化市是一座具有“寒地黑土”之称的农业的城市,在供电需求上存在着点多面广的分布格局。为更好的服务广大客户,从2018年开始绥化市郊农电局在国网绥化供电公司的带领下创新
本文提出了一个基于心理声学理论和实验的听觉感知模型,它模拟了人对声音响度的听觉感知特征。该模型可在数字信号处理器(DSP)或计算机上实现,模型的输出参数已被用于语音识
在5 L发酵罐上,以考察搅拌转速、补料及p H值对菌株Pseudoalteromonas carrageenovora ASY5产卡拉胶酶的影响进行优化,建立卡拉胶酶的高产发酵工艺。结果表明:提高搅拌转速能
尤多拉·韦尔蒂在美国当代文学史中有相当重要的地位,该文通过研究她重要的三部作品《绿帘》、《金苹果》、《乐观者的女儿》中的“外来者”,表现出尤多拉·韦尔蒂思