新型重组毒素对卵巢癌血管生成和生长抑制作用的研究

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目的:探讨新型重组毒素uPAa-melittin对卵巢癌血管生成和生长的抑制作用。方法:建立人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型,随机分成5组,每组7只裸鼠:(1)uPAa-melittin小剂量组:0.25mg/kg。(2)uPAa-melittin中剂量组:0.5mg/kg。(3)uPAa-melittin大剂量组:1.0mg/kg。(4)顺铂组:2mg/kg。(5)模型组(生理盐水组):生理盐水腹腔内注射,每组均以0.2ml的剂量经腹腔注射给药。给药方法均为自裸鼠接种SKOV3细胞后第8天至第21天中,每周给药3次,共计给药6次。实验开始后,每天定时观察裸鼠的一般状态,观察饮食及饮水情况,对外界刺激的反应性,观察皮下移植瘤的生长情况,同时使用游标卡尺记录瘤体的最长径和最短径,计算肿瘤体积,同时计算各给药组抑瘤率。免疫组化法检测各组血管内皮生长因子VEGF蛋白表达及瘤体组织中微血管密度(MVD)。结果:(1)uPAa-melittin小剂量组、uPAa-melittin中剂量组、uPAa-melittin大剂量组及顺铂组裸鼠荷瘤体积明显小于模型组,差异有统计学意义(P<0.05),抑瘤率分别为30.36%、30.85%、38.99%、42.53%。(2)模型组MVD9.7±1.0、uPAa-melittin组MVD6.5±0.6,顺铂组MVD7.4±1.5(P<0.05)。模型组、顺铂组及uPAa-melittin小剂量组、uPAa-melittin中剂量组、uPAa-melittin大剂量组VEGF计数分别为44.8±8.64、34.6±4.21、34.2±4.43、30.2±4.14、28.0±5.43,uPAa-melittin各组与模型组相比较P<0.05,差异具有统计学意义。结论:(1)顺铂组及uPAa-melittin小、中、大剂量组裸鼠皮下移植瘤的肿瘤体积与模型组相比较明显减小。随着uPAa-melittin给药剂量的增加,抑制肿瘤生长的作用也更加明显,呈现出一定的剂量与效应关系。同时比较各给药组的抑瘤率,也支持上述观点,给药期间对比给各给药组裸鼠体重的变化,顺铂组裸鼠体重下降明显,与模型组及各uPAa-melittin组相比差异具有统计学意义。各uPAa-melittin组与模型组裸鼠体重比较,给药前后差异无统计学意义,由此证明uPAa-melittin毒副作用较小,用药安全性高。(2)各组uPAa-melittinVEGF阳性表达率明显低于模型组(P<0.05),说明uPAa-melittin能够抑制卵巢癌组织中VEGF的表达。同时在微血管密度(MVD)方面模型组高于uPAa-melittin组,uPAa-melittin组与对照组之间差异有统计学意义(P<0.05)。uPAa-melittin可以降低人卵巢癌移植瘤的MVD,显示出具有抗肿瘤血管生成的作用。
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