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CpG寡脱氧核苷酸(CpG oligodeoxynucleotides,CpG ODN),是人工合成的能够模拟细菌DNA的免疫刺激活性的含有CpG基序的ODN,大量研究表明,它们能激活人类、哺乳类及鱼类等动物的免疫系统,是一类良好的非特异性免疫增强剂与特异性免疫佐剂。但是,迄今为止,尚未见有关CpG ODNs对中华绒螯蟹免疫功能影响及其作用机理的研究报道。为探讨CpG ODNs对中华绒螯蟹蟹免疫功能及抗病力的影响,进行试验一。将ODN-1670(含1个CpG基序)和ODN-R(含1个反向CpG基序,即GpC)按1、5、25μg/kg体重的剂量体腔注射中华绒螯蟹,在注射之前(0d)和注射后第1、3、5、8d采样,同时以注射0.1mL生理盐水组与未进行任何处理的空白组作为对照,进行一系列免疫学指标的测定;并在第二次采样(第3d)时,从每个处理组中取蟹6只,以1.2×10~7cfu/kg体重的剂量体腔注射蟹致病性嗜水气单胞菌CL99920菌株,记录接种7d后各组蟹的累积死亡率。结果显示,注射适量的ODN-1670能显著地增加中华绒螯蟹的血细胞总量(THC)、透明细胞(HC)、小颗粒细胞(SGC)和颗粒细胞(GC)数量,显著地增强血细胞的吞噬活性和呼吸爆发活性,显著地增强血清酚氧化酶(PO)、过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)、酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(ALP)、溶菌酶(LSZ)、溶血素(Hemocytin)及抗菌活性(Ua)(P<0.05)。此外,本试验条件下,ODN-1670还能明显提高中华绒螯蟹对嗜水气单胞菌的抗感染能力。与此同时,试验剂量的ODN-R除能使血清酚氧化酶活性显著增加(P<0.05)外,对其他免疫指标的影响均不显著。本试验表明,适量的ODN-1670能增强中华绒螯蟹的免疫功能和抗病力,是适合中华绒螯蟹的新型潜在免疫增强剂,可进一步加以研发和利用。为初步探讨CpG ODN激活中华绒螯蟹血细胞酚氧化酶原(proPO)激活系统的信号转导途径,进行试验二。用适量的CpG ODN和几种细胞信号转导的激活剂或抑制剂处理M-199培养的离体中华绒螯蟹血细胞,通过检测血细胞胞内外酚氧化酶(PO)的增减情况,对CpG ODN触发proPO激活系统的信号转导途径进行评价。结果表明,本次试验所选ODN-1670与ODN-R均可触发蟹血细胞proPO激活系统。两者的信号转导途径相似,有可能都包含了G-蛋白介导的蛋白激酶C(PKC)途径,酪氨酸蛋白激酶(RTK)途径对ODN-1670的触发proPO激活系统的活化过程进行负调控。而依赖于cAMP的蛋白激酶A(PKA)途径可能不参与两种ODN诱导的proPO系统的活化过程。