阿仑膦酸钠对实验性大鼠腰椎关节突骨关节炎的干预作用

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目的本实验探究雄性SD大鼠腰椎小关节关节腔内注射Ⅱ型胶原酶(collagenase Ⅱ,Ⅱ)诱导腰椎实验性小关节骨关节炎(Facet joint osteoarthritis,FJOA)模型的可行性,并使用阿仑膦酸钠(Alendronate sodium tabiets,ALN)干预该大鼠实验性小关节骨关节炎模型,探究ALN对关节软骨和软骨下骨的作用。方法使用30只3月龄SPF级雄性SD大鼠,将其随机分成三组:假手术组(Sham组)、Ⅱ型胶原酶组(CⅠ组)、Ⅱ型胶原酶+阿仑膦酸钠组(ALN组),每组各10只。CⅠ组和ALN组进行造模,在大鼠腰椎小关节(Facet joints,FJ)腔内注射Ⅱ型胶原酶(选择右侧L3–4、L4–5、L5–6小关节),Sham组进行假手术但不注射CⅡ。术后ALN组皮下注射阿仑膦酸钠,剂量为70μg/kg/week,CⅠ组及Sham组注射等量生理盐水,8周后处死动物并收集标本,并进行相关检测,包括:Micro-CT、改良Mankin评分评估标本软骨退变情况、免疫组化染色检测软骨中Caspase-3和ADAMTS-4的表达情况;使用ELISA检测人类软骨寡聚蛋白(COMP)的浓度。最后将数据进行统计学分析。结果Micro-CT结果示:CⅠ组较Sham组软骨下骨密度(BMD)、骨体积分数(BV/TV)、骨小梁厚度(Tb.Th)显著降低(P<0.05),骨小梁分离度(Tb.Sp)显著升高(P<0.05);当使用ALN干预后,ALN组较CⅠ组BMD、BV/TV、Tb.Th显著升高(P<0.05),Tb.Sp显著降低(P<0.05)。改良Mankin评分结果示:相较于Sham组,CⅠ组评分显著升高(P<0.05),进行药物干预后,ALN组评分显著降低(P<0.05)。免疫组化结果示:CⅠ组与Sham组相比,软骨细胞中Caspase-3和ADAMTS-4阳性表达及平均光密度值(IOD/mm~2)均显著升高(P<0.05),ALN组与CⅠ组相比,Caspase-3和ADAMTS-4阳性表达及IOD值均显著降低(P<0.05)。ELISA结果示:CⅠ组与Sham组相比,血清COMP浓度显著升高(P<0.05),ALN组与CⅠ组相比,血清COMP浓度显著降低(P<0.05)。结论大鼠腰椎FJ关节腔内注射CⅡ可成功建立FJOA模型,并诱导其关节软骨和软骨下骨的退变。ALN治疗能够有效延缓大鼠FJOA软骨的退变进程并能改善软骨下骨的微结构,对FJ具有保护作用。图8幅;表1个;参100篇。
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