电离辐射对机体的损伤是通过原发作用的直接和间接作用,引起生物分子结构和性质的变化,出现相应生化代谢紊乱,继而导致各种慢性疾病等。筛选高效低毒的辐射防护剂已成为科研工作者研究的热点。针对两个或两个以上多个通路的天然产物组合作为一种新型的辐射防护剂,被认为是更好的延迟辐射损伤的方法。新的证据表明,多靶向或不同靶向剂组合具有多种途径的抗辐射活性,而不会引起任何毒性,将有利于预防或治疗电离辐射损伤。因此,通过体外抗氧化的相互作用效果研究,从6种多酚中筛选出与黑木耳多糖（AAP）协同抗氧化活性最强的葡萄籽原花青素（GSP）作为后续研究目标,并对AAP组成和结构进行分析,研究AAP-4与GSP的组合对辐射诱导氧化损伤协同防护功效,进一步揭示其作用机制。通过6种具有代表结构的多酚与黑木耳多糖对ABTS^+·和DPPH^·自由基清除效果为50%的研究分析,表明GSP与AAP的组合对ABTS^+·（CI 0.41±0.06）和DPPH^·（CI 0.91±0.09）清除具有较好的协同抗氧化效果。通过在体外抗氧化模型,使用Compusyn软件,系统分析了AAP与GSP体外抗氧化的相互作用效果,结果表明AAP与GSP对ABTS^+·、O₂^-·、DPPH^·和OH^·自由基的清除效果,具有显著的协同效应,从而降低组分的使用剂量;对总还原能力,具有一定的协同效应;而对脂质过氧化的抑制作用,未显示出协同效果。通过DEAE-52、Sephadex G-200层析对AAP进行纯化,得到主要成分AAP-4。采用FT-IR、HP-GPC、GC-MS对其结构进行表征,研究发现AAP-4分子量为3.30×105,由D-木糖、D-甘露糖、D-葡萄糖以及D-半乳糖以摩尔比例1.97:4.67:9.91:0.31组成,通过甲基化和NMR对AAP-4结构做进一步表征,结果得出AAP-4的糖残基构型主要为α-D-Xylp-)1→、3,6→)-α-D-Manp-（1→和4→）-β-D-Glcp-（1→,AAP-4主链是由Glcp和Manp组成的甘露葡聚糖,α-D-Xylp-）1→为末端残基。通过细胞和小鼠的辐射诱导氧化损伤模型,研究AAP-4与GSP对脾细胞的协同辐射防护作用,研究结果表明AAP-4与GSP组合显著的增加了脾细胞的存活能力、脾细胞的增殖能力,进而协同提升了机体的免疫活性;表明AAP-4与GSP组合能够通过降低氧化产物量,提高抗氧化物质的含量,减少辐射对脾细胞DNA的损伤,从而起到了有效的协同辐射防护作用。通过对细胞周期进行分析,研究AAP-4与GSP的协同辐射可能防护机制,表明AAP-4与GSP的组合能够抑制60Co-γ射线辐射诱导G0/G1期小鼠脾细胞的停滞,并对60Co辐射诱导的脾细胞凋亡起到协同防护功效;利用免疫组织化学的方法,通过对细胞凋亡线粒体途径进行分析,研究发现AAP-4与GSP能够通过抑制Bax、细胞色素c和Caspase-3的表达,促进Bcl-2的表达,最终达到协同抑制脾细胞凋亡的效果。本研究发现AAP-4与GSP的组合可以提高机体抗氧化状态及免疫能力,通过线粒体凋亡途径来抑制脾脏细胞凋亡,对辐射诱导氧化损伤显示出协同防护功效。本研究对于揭示60Co辐射防护机制具有理论价值,对进一步研发复合辐射防护剂具有重要意义。