沙棘木蠹蛾PBAN与JHAMT的分子特征及对性信息素合成调控的研究

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在许多昆虫物种中,雌虫释放一种性信息素来吸引雄虫进行交配,性信息素在很大程度上决定了昆虫交配的成功与否。由于性信息素具有种间特异性,使其成为研究物种进化、生殖隔离及生态稳定的良好材料。性信息素的合成受到一系列的内在机制的调控,其中性信息素合成激活神经肽(pheromone biosynthesis activating nuropeptide, PBAN)和保幼激素(juvenile hormone, JH)是重要的调控因子。保幼激素酸甲基转移酶(JHAMT)是JH合成过程中的关键酶,可通过对JHAMT基因的研究,了解JH的生理学作用。本项研究以害虫沙棘木蠹蛾Holcocerus hippophaecolus为研究对象,通过基因测序、定量PCR等分子生物学手段研究了PBAN及JHAMT的分子特征,首次获得了这两个基因的全序列,解析了PBAN及JH对性信息素合成的作用关系。研究结果如下:(1)PBAN的全序列大小为790bp,包含了五种神经肽:滞育激素(DH)、α神经肽、β神经肽、PBAN和γ神经肽,这五种神经肽在C末端含有一个高度保守的FXPRL序列区域,多序列比对分析及系统发育分析证实了沙棘木蠹蛾H.hippophaecolus PBAN与夜蛾科的亲缘性最近;(2)利用实时定量分析证实了沙棘木蠹蛾H.hippophaecolus PBAN在咽下神经节中表达水平最高,并且在幼虫阶段及成虫阶段的表达水平相对较高,而在蛹期表达水平显著下降,这种表达图谱提示PBAN在幼虫发育及雌虫性信息素合成中起着调控作用;(3)JHAMT全序列大小为1659bp,序列中含有一个高度保守的Motif I区域,此区域是S-腺苷甲硫氨酸(SAM)存在的区域,提示沙棘木蠹蛾H.hippophaecolus JHAMT属于SAM依赖性甲基转移酶家族,多序列比对分析及系统发育分析证实了沙棘木蠹蛾H.hippophaecolus JHAMT与夜蛾科的同源性最高;(4)利用实时定量分析确认了沙棘木蠹蛾H.hippophaecolus JHAMT在咽侧体中表达水平最高,并且从幼虫阶段发育到蛹期表达水平逐渐下降到未检测到的水平,到成虫阶段表达水平随着发育而逐渐上升,这种表达模式与JH合成表达模式是相似的,建议JHAMT是JH合成中的关键限速酶。JHAMT的分子特征与相对表达的分析为JH对昆虫幼虫生长发育、变态过程以及对成虫的生殖过程的作用提供了分子基础。
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