外源氨基酸对Bt棉杀虫蛋白含量影响及蛋白质周转机制

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转Bt基因抗虫棉生殖器官杀虫蛋白低表达量影响抗虫性。为提高生殖器官蕾花铃杀虫蛋白的表达,以常规品种泗抗1号(s1)和杂交品种泗抗3号(s3)为试验材料,分别于2016年、2017年和2018年在以前研究基础上设计构成Bt蛋白主要成份的5种氨基酸和所有21种氨基酸处理喷洒蕾花铃探讨氨基酸外用对Bt棉生殖器官杀虫蛋白表达量影响及相关的蛋白质周转机制。研究结果表明:与对照相比,两个氨基酸处理均显著提高了蕾的Bt蛋白含量,Bt蛋白含量增加7.4%-19.4%,全氨基酸应用对棉蕾Bt蛋白含量提高的幅度更大主要与蛋白质降解酶蛋白酶和肽酶活性下降幅度更大有关。氨基酸处理显著提高花中Bt蛋白含量,比对照提高了15.2%~25.8%。但两个氨基酸处理间差异不显著。相似地,2个氨基酸处理的铃壳、棉子和纤维中Bt蛋白也显著提高。如花后25天,泗抗1号Bt蛋白含量量铃壳中提高了 7.4%%-9.30%、棉子中高了23.9%-71.1%,纤维中提高了 23.8%-172.0%;泗抗3号Bt蛋白含量量铃壳中提高了39.0-41.3%、棉子中提高了 15.8%-53.8%、纤维中提高了 20.0%-230.3%。此外,花和铃的2个氨基酸处理间Bt蛋白含量则未见显著差异。蛋白质周转的生理机制研究则表明,在氨基酸处理下,蕾花铃中的氨基酸和可溶性蛋白含量增加,GPT和GOT活性提高,蛋白酶和肽酶活性下降。相关分析则表明:蕾花铃中的氨基酸和可溶性蛋白含量、GPT和GOT活性与其Bt蛋白含量呈显著以上水平正相关、蛋白酶和肽酶活性与其Bt蛋白含量呈负相关。以上结果揭示了氨基酸的外用导致生殖器官蕾花铃中蛋白质合成能力的提高、分解能力的下降,从而增加了蛋白质含量,包括Bt蛋白水平的提高。由于2个氨基酸处理中花和棉铃中Bt蛋白浓度在统计学上没有显著差异,且21种氨基酸混用的花费也较高。因此建议在生产时可选用构成Bt蛋白的5种氨基酸混用即可。
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