睡眠诱导对偏头痛大鼠行为及不同脑区腺苷2A受体表达的影响

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目的:1.观察偏头痛大鼠模型不同脑区腺苷2A受体的表达。2.探讨睡眠诱导对偏头痛大鼠行为学及不同脑区腺苷2A受体表达的影响。方法:1.将30只成年雄性SD大鼠随机分成三组:A空白组、B模型组和C假手术组。A空白组不作任何处理;B模型组建立电刺激硬脑膜大鼠偏头痛模型;C假手术组仅做电极放置手术操作,不予电刺激。2.电刺激结束后将各组SD大鼠置于安静环境中,10 min后观察并记录大鼠10 min内过度理毛、打转及爬笼次数,并进行行为学评分。应用免疫组化与Western Blot检测各组大鼠腺苷2A受体在中央导水管周围灰质(PAG)、三叉神经脊束尾核(TNC)和三叉神经节(TG)上的表达。3.将成功造模的偏头痛模型大鼠30只随机分成三组:D对照组、E睡眠诱导组、F假睡眠诱导组。E睡眠诱导组给予25mg/kg地西泮腹腔注射后诱导睡眠1.5h;F假睡眠诱导组给予同等剂量地西泮腹腔注射后干扰睡眠1.5h,使大鼠保持清醒;D对照组给予同等剂量生理盐水腹腔注射后干扰睡眠1.5h,使大鼠保持清醒。4.诱导睡眠1.5h后将各组SD大鼠置于安静环境中,10 min后观察并记录大鼠10 min内过度理毛、打转及爬笼次数,并进行行为学评分。应用免疫组化与Western Blot检测各组大鼠腺苷2A受体在中央导水管周围灰质(PAG)、三叉神经脊束尾核(TNC)及三叉神经节(TG)上的表达。结果:1.电刺激大鼠硬脑膜后大鼠行为学变化。与C假手术组相比,B模型组大鼠过度理毛、打转及爬笼评分显著增高,行为学评分显著增高(p<0.001);A空白组和C假手术组之间无统计学差异,表明造模成功。2.电刺激后腺苷2A受体在PAG、TNC、TG上的表达。免疫组化结果显示:B模型组相比较C假手术组,PAG上腺苷2A受体表达明显增高(p<0.001),TNC上腺苷2A受体表达也明显增高(p=0.002),A空白组和C假手术组之间无统计学差异。TG上未检测到腺苷2A受体的表达。Western Blot结果显示:B模型组相比较C假手术组,PAG、TNC、TG 上腺苷 2A 受体表达皆显著增高(PAG:p=0.036,TNC:p=0.042,TG:p=0.034),A空白组和C假手术组之间无统计学差别。3.偏头痛模型大鼠睡眠诱导后行为学变化。与F假睡眠诱导组相比较,E睡眠诱导组大鼠过度理毛、爬笼评分显著降低,行为学评分明显降低(p=0.006)。D对照组和F假睡眠诱导组之间无统计学差异。4.睡眠诱导后偏头痛模型大鼠PAG、TNC、TG上腺苷2A受体的表达。免疫组化染色结果示:E睡眠诱导组相比较F假睡眠诱导组,腺苷2A受体在PAG、TNC上表达明显下降(PAG:p=0.020,TNC:p=0.038),D对照组和F假睡眠诱导组之间无统计学差异。TG上未检测到腺苷2A受体的表达。Western Blot结果显示:E睡眠诱导组相比较F假睡眠诱导组,PAG、TNC、TG上腺苷2A受体表达皆明显下降(PAG:p=0.032,TNC:p=0.028,TG:p=0.048),D对照组和F假睡眠诱导组之间无统计学差异。结论:1.地西泮睡眠诱导可以降低偏头痛大鼠行为学评分,缓解偏头痛样症状。2.偏头痛大鼠模型中腺苷2A受体在偏头痛相关脑区上表达增加,表明腺苷2A受体表达上调可能与大鼠偏头痛样发作有关。3.睡眠诱导偏头痛大鼠可降低腺苷2A受体在偏头痛相关脑区上的表达,提示睡眠诱导可能是通过降低腺苷2A受体的表达从而起到缓解偏头痛发作的作用。
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