伤寒杆菌质粒pR<,ST98>的DNA限制性内切酶分析和药物的体外消除研究

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第一部分伤寒杆菌质粒pR<,ST98>的DNA限制性内切酶谱.该研究选用8种限制性核酸内切酶(EcoRⅠ,BamHⅠ,HindⅢ,EcoRⅤ,BglⅡ,PstⅠ,SalⅠ和HincⅡ)对分离自多重耐药伤寒杆菌的质粒pR<,ST98>进行酶切,建立了该质粒酶切指纹图谱,为分析该质粒的遗传特征、流行病学追踪和基因功能定位提供了重要的分子标志.从酶切图谱可见BglⅡ、HincⅡ、EcoRⅤ和PstⅠ的酶切片段较为均一,是对该质粒进行分子生物学和分子流行病学研究的理想工具.第二部分药物对肠道杆菌携带的耐药质粒pR<,ST98>的体外消除作用.该部分研究探讨用中西药在体外消除肠道杆菌携带的耐药质粒pR<,ST98>的可能性.将原存在于伤寒杆菌中的耐药质粒pR<,ST98>经接合转移分别导入大肠杆菌和鼠伤寒杆菌,选用氧氟沙星和双黄连对上述三种细菌进行亚抑菌浓度的消除试验,并对实验前后的受式菌分别进行K-B纸片扩散法得出小抑菌浓度法(MIC)药敏试验及质粒电泳检测.结果表明,两种药物在体外未能将受试菌携带的pR<,ST98>消除;但该质粒编码的耐药标志减少;部分菌株对原有药物的耐药程度明显下降.氧氟沙星和双黄连能降低pR<,ST98>宿主菌的耐药性,但药物作用后同一质粒在不同宿主菌中耐药性变化的差异,显示该质粒表达的多样性和复杂性.
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