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目的:观察周期性动态压缩应力对骨髓间充质干细胞软骨分化的作用,同时对比分析力学因素对敲减SOX9基因骨髓间充质干细胞软骨分化过程中的作用,探讨力学因素与SOX9在软骨分化过程中的重要作用。方法:取4周龄昆明小鼠骨髓间充质干细胞(C),体外培养至第三代,流式细胞仪鉴定细胞表型确定为干细胞,将构建的小鼠SOX9基因干扰的慢病毒载体体外转染小鼠骨髓间充质干细胞,构建SOX9敲减的骨髓间充质干细胞(si C)。分别将C细胞和si C细胞以1x107/ml的密度与2%海藻酸钠凝胶混匀,制成圆柱形载体。根据实验过程中对载体的处理因素的不同将试验分为8组:各组在试验的前7天均给予软骨诱导液处理。A组:C细胞加力未诱导组:在软骨诱导液诱导7天后再给予7天的加力未诱导处理;B组:C细胞加力诱导组:在软骨诱导液诱导7天后再给予7天的加力诱导处理;C组:诱导不加力组:在软骨诱导液诱导7天后再给予7天的诱导不加力处理;D组:si C细胞加力未诱导组;E组:si C细胞加力诱导组;F组:si C细胞诱导不加力组;D、E、F组的处理分别同A、B、C组。G、H组为分别为C细胞、si C细胞未加力、未诱导的对照组:诱导7天后予以普通培养液培养;实验采用Flexcell-5000基底加载系统对细胞盘施加正弦波、0.5HZ、20Kpa、2h/d压缩应力。在相关处理后采用RT-PCR分析SOX9、ROCK1及COL-Ⅱ的表达。应用免疫荧光技术对各组处理前后的COL-Ⅱ表达进行监测。结果:RT-PCR检测:SOX9及COL-Ⅱm RNA表达:B组高于C组及A组,C组较G组表达高,E组高于F组及D组,D组高于H组(P<0.05)。A组与G组表达相当,B组及E组表达无显著差异(P>0.05)、ROCK1m RNA:E组高于B组(P<0.05)。免疫荧光检测显示B组及E组均有二型胶原免疫荧光表达。结论:周期性动态压缩应力可以促进间充质干细胞的软骨分化。周期性动态力学加载可以增加敲减SOX9基因骨髓间充质干细胞的SOX9、COL-Ⅱ的表达,降低ROCK1的表达,周期性动态压缩应力可能通过SOX9相关通路促进间充质干细胞的软骨分化。