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【目的】探讨骨桥蛋白(Osteopontin, OPN)在肝细胞癌(Hepatocellular Carcinoma,HCC)组织中的表达情况与临床病理因素的关系;探讨血浆OPN作为HCC生物标志物的应用价值;探讨抗OPN抗体对人肝癌HCCLM3细胞裸鼠移植瘤生长、转移和血管生成的抑制作用及对放疗的增敏作用。【方法】1.第一部分,采用S P免疫组织化学法检测OPN在70例肝癌组织、15例肝硬化组织和10例正常肝组织中的表达情况。2.第二部分,应用ELISA法检测70例HCC患者、65例慢性肝脏疾病(Chronic Liver Diseases,CLD)患者及65名健康人血浆OPN及甲胎蛋白(Alpha-fetoprotein,AFP)浓度。3.第三部分,74只裸鼠右侧背部皮下接种肝癌细胞株HCCLM3,次日随机取50只裸鼠随机分为5组每组10只:A组尾静脉注射生理盐水,B组尾静脉注射非特异性抗体,C、D、E组分别尾静脉注射抗OPN抗体5mg/kg、10mg/kg、20mg/kg,每周两次。每两天观察肿瘤体积变化,第10周末处死裸鼠,收集肿瘤组织、肺组织进行病理组织学检查,用免疫组化法测肿瘤微血管密度(Microvesseldensity,MVD)。其余24只裸鼠随机分为4组:F组尾静脉注射生理盐水、G组肿瘤局部以6MeV电子线照射、H组尾静脉注射抗OPN抗体20mg/kg、I组尾静脉注射抗OPN抗体20mg/kg+肿瘤局部6MeV电子线照射。观察肿瘤体积变化,比较各组的肿瘤体积、抑瘤率,利用增敏系数(Enhancement Factor, EF)评价抗OPN抗体对放疗的增敏作用。【结果】1.在肝癌组织中OPN的表达水平显著高于肝硬化组织及正常肝组织(P<0.001);且OPN在肝癌组织中的高表达与肿瘤包膜不完整(P=0.044)及早期转移、复发(P=0.003)显著相关。2. HCC组血浆OPN浓度(中位数975ng/ml,范围131-5920)明显比CLD组(352ng/ml,18-1875)或健康人组(103ng/ml,8-984)高(P<0.001)。在HCC组,随着患者血浆OPN浓度的升高,Child-Pugh分级及肿瘤分期也随之升高,并且血浆OPN浓度与肿瘤包膜的完整性相关(P<0.05)。OPN诊断HCC的敏感度、特异度及临界值分别为87.1%、75.4%、642.5ng/ml。OPN曲线下面积(0.872)比AFP(0.817)大(P<0.01)。3.与A、B对照组相比5mg/kg、10mg/kg、20mg/kg各剂量的抗OPN抗体均能明显抑制肿瘤的生长(P﹤0.01)、降低血管密度(P﹤0.05)、减少肺转移(P﹤0.05),其中以20mg/kg剂量组最明显。在放疗的实验中,联合组I组局部肿瘤生长受到明显抑制,抑瘤率为41.67%,明显高于单纯放疗G组(24.04%,P﹤0.01)和抗OPN抗体H组(11.86%,P﹤0.01)。EF﹥1,提示抗OPN抗体对移植瘤有放疗增敏作用。【结论】1. OPN在肝癌组织中显著高表达,且与肿瘤包膜完整性,早期复发、转移密切相关。2.血浆中OPN浓度可以作为诊断HCC潜在的参考分子指标之一。3.抗OPN抗体能明显抑制肿瘤的生长、转移、血管生成,并能提高肝癌对放疗的敏感性。