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水牛乳的蛋白质、脂肪、乳糖、矿物质等的含量都高于荷斯坦奶牛乳,水牛奶中的脂肪酸种类特别丰富,包含多种饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸。硬脂酰辅酶A去饱和酶1(SCD1)是一种内质网酶,催化由从头合成或从膳食中摄取的饱和脂肪酸转化成单不饱和脂肪酸以提高脂肪酸的不饱和指数。为全面了解荷斯坦奶牛、意大利水牛与杂交水牛乳中脂肪酸种类和含量的差异,探究SCD1等脂肪酸代谢相关基因在水牛和荷斯坦奶牛乳中表达的差异性,以及脂肪酸代谢相关基因SCD1在水牛乳腺上皮细胞中的生理作用。本研究应用气相色谱法分别测得处于泌乳中期的30份意大利水牛乳样、30份杂交水牛乳样以及30份荷斯坦奶牛乳样的脂肪酸种类和含量,进而分析得到脂肪酸成分表和脂肪酸分布图,同时也用乳成分分析仪检测了三种牛乳基本成分的差异。用RNA干扰和慢病毒过表达两种方法验证SCD1基因对乳脂肪酸合成过程中相关基因的影响,结果发现:1.以每100 g牛乳中含有的脂肪酸量来计,意大利水牛和杂交水牛奶中的各种类脂肪酸含量显著高于荷斯坦奶牛(p<0.01)。三种牛乳中脂肪酸均是C16:0含量最高,在意大利水牛乳中含量高达2986.31mg/100g,占35.33%。另外C18:1含量达到2419.31mg/100g,占28.62%。两种水牛乳中对人体有益的不饱和脂肪酸也显著高于荷斯坦奶牛,其中共轭亚油酸CLA和EPA都显著高于荷斯坦奶牛(p<0.01)。同时意大利水牛乳和杂交水牛乳中的脂肪、蛋白质、乳糖均显著高于荷斯坦奶牛乳(p<0.01)。2.意大利水牛乳中的SCD1基因表达量显著高于荷斯坦奶牛乳(P<0.01),脂肪酸代谢相关基因Fas、Srebp、Ppary、Gpam、Agpat6和Acaca的表达量均显著高于荷斯坦奶牛乳(P<0.01)。3.通过RNAi试验发现siRNA-SCD1成功干扰了水牛乳腺上皮细胞中SCD1基因的表达,SCD1基因表达量下降了41%。qRT-PCR结果显示:干扰SCD1基因后,脂肪酸代谢相关基因FAS和Ppary的表达量显著升高(P<0.01),Srebp基因的相对表达量升高但无显著差异(P>0.05),而Acaca、Agpat6和Gpam基因的相对表达量显著降低(P<0.01)。SCD1过表达慢病毒颗粒感染水牛乳腺上皮细胞后,SCD1基因的表达量升高了 7.8倍,Acaca和FAS表达水平降低(P<0.01),Gpam、Agpat6、Srebp1和Ppary基因的表达水平都显著升高(P<0.01)。干扰组细胞中的饱和脂肪酸的含量升高而不饱和脂肪酸的含量降低。其中C16:0和C18:0的含量升高,不饱和脂肪酸C16:1、C18:1的含量降低但均不显著,C18:2的含量几乎无变化。过表达组细胞中的脂肪酸总量升高,饱和脂肪酸的含量降低,不饱和脂肪酸的含量升高。其中C16:0和C18:0的含量降低,不饱和脂肪酸C16:1、C18:1和C18:2的含量升高,结果与干扰组相反,与预期结果相符。实验结果表明SCD1基因对饱和脂肪酸C16:0和C18:0,不饱和脂肪酸C16:1、C18:1和C18:2有重要的调控作用。