前言 癌症对人类健康和生命的威胁很大。在我国肺癌的发病率和死亡率高居所有恶性肿瘤首位,并以每年0.5%的速度增长。中医中药治疗癌症对于减轻病人的症状和痛苦,提高生存质量,延长生命,降低死亡率,都有其重要的意义。我国学者近几年来已开始进行中药诱导肿瘤细胞凋亡的研究。目前为止,已发现多种中药提取物在体外实验中有诱导肿瘤细胞凋亡的作用。探讨中药诱导肿瘤细胞凋亡作用,将进一步揭示中医药治疗肿瘤的机制,促进抗肿瘤研究向纵深发展。本研究室对中药、天然药物的研究有着丰富的经验,已成功地从传统中药茵陈中提取主要有效成分,并有深入研究。本实验中的中药X也是重点研究的中药之一,实验中将对其抗肿瘤作用进行初步探讨。 材料与方法 一、实验材料 1.A549细胞株:人肺腺癌细胞株。 2.试剂:中药X、优级新生牛血清、胰蛋白酶、RPMI-1640培养基、碘化丙啶(PI)、RNA酶A、MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒。 3.实验设备:流式细胞仪、倒置荧光显微镜、分析天平、离心机、二氧化碳培养箱、超净台、电脑压力蒸气灭菌器。 二、实验方法 1.A549细胞的增殖抑制实验 收集细胞,使其成为单细胞悬液,调整细胞浓度为5×10~4个/ml;取一块96孔培养板,每孔分别加入90μl的单细胞悬液,使每孔内细胞数量约为4000～5000。用移液器将不同浓度的药物和0.9%生理盐水分别加入到单