头发是头面部特征的一个重要组成部分,它不但能参与勾勒一个人的脸型,而且能够影响到一个人的外表年龄,它的缺失会给患者带来极大的精神压力。随着生活水平的提高,人们对脱发的诊治要求日益迫切,现代医学也越来越重视对脱发的研究。在众多脱发病因中,雄激素性脱发是最常见也是影响范围最广的一种脱发。虽然通过外涂药物米诺地尔和内服药物非那雄胺等对雄激素性脱发的治疗有确切疗效,可是,由于其仅仅只是延缓或者阻止毛发脱落,并不能促使已脱毛发重新生长,因此,药物治疗并不适用于严重脱发患者；同时,由于药物治疗还具有停药后会脱发仍然会继续发生缺点,因此,自从1959年Orentreich通过临床试验提出“供区优势”的理论以来,毛发移植术就成为治疗各种脱发最直接有效的方法。在治疗秃发时,虽然毛发移植术有着“一劳永逸”的优点,但其同时也存在着外形不自然和成活率较低的缺点。因此,在过去的几十年间,虽然毛发移植术的基本原则始终变化不大,但其治疗技术及方法却得到不断的改进与提高,针对毛发移植术后外形不自然和成活率低的缺点,1984年Headington首次提出毛囊单位的概念,他通过研究表明毛发并非均匀分布,而是以每1-3根为一个单位出现,每一个单位有其相对独立的皮脂腺、立毛肌、毛囊周围血管神经丛,称其为毛囊单位,这也就意味着毛发移植过程中,如果以毛囊单位为单元进行移植,那么就可以解决毛发移植的上述缺点。但是,在此后的几年中,毛囊单位并未受到各国研究者的重视,因此在临床毛发移植过程中,临床医生也未以毛囊单位为单元进行移植。直到1990s,在国际毛发移植年会上才提出毛囊单位移植(follicular unit transplantation, FUT)这一概念,并使之成为毛发移植的金标准。毛囊单位移植依赖于切取枕部安全供区的含有完整毛囊的全厚头皮条,在显微镜或放大镜下分离切割获得单个或多个毛囊单位,或者直接行毛囊拔出,然后将其植入用针具在秃发区预制的的针孔内或者用小的手术刀片在头皮上切开的缝隙内。由于术后移植物要经历一个退行期后重新在受区长出毛发,因此在手术6个月后才可以看到明显的手术效果,如果要获得比较满意的外形效果,通常需要经历2次左右的手术。由于毛囊单位移植能塑造出较自然的毛发外观,近年来,该技术被广泛应用于头发、眉毛、胡须,甚至是阴毛的修复。虽然毛囊单位移植已成为毛发移植的金标准,然而由于毛囊单位极小,同其它移植物比如微小毛胚相比显得比较脆弱,因此在分离毛囊移植物过程中也就存在其易损伤性的问题。国内外许多学者已经比较深入的研究了在毛发移植过程中,有哪些因素能够影响毛囊单位移植后成活率的问题。然而,目前各个研究单位及医院对毛囊单位移植物的具体成活率尚未形成一致看法,主要是由于影响毛囊单位移植成活率的因素很多。毛囊单位在分离过程中的切割、挤压、干燥、存储条件等都会影响其移植后的成活率,甚至Fan和Kohn等认为局麻药中加的副肾素对毛囊单位的存活率也有影响。Greco等提出毛发移植术后成移植物的存活率低的原因主要是医源性因素造成的,也即是人为因素。然而,Gandelman等提出在毛囊单位的分离过程中,对其适当的挤压、弯曲不会影响其成活率,可是他却没有对毛囊移植物的大小进行描述,同时其实验还存在着样本量小的问题,不能充分的支持其结论。Seager等通过对比试验提出：毛囊周围如果留有较多保护组织的话可以提高其移植后的成活率,后来也被Michael证实,但是他们的研究结论还是有争议的,同时,他们的试验均没有给出一个关于毛囊移植物具体大小的定量标准。1.毛囊单位修剪的大小不仅影响着其移植后的成活率,还与毛发移植密度密切相关。相关文献关于修剪毛囊大小只是说保留真皮,皮脂腺等周围组织,但具体毛囊外根鞘周围保留多少厚度至今尚未有一个定量标准。尤其对于国内而言,还未有关于毛囊修剪大小与其成活率关系的研究。2.在毛发移植过程中,对毛囊单位的分离及种植过程中很难避免用移植器械夹持毛囊单位,但是,在力度和时间恒定的条件下,移植器械对毛囊单位夹持部位的不同对移植物成活率所产生的影响尚不清楚,至今尚未有关于这方面的研究。基于上述问题我们设计了本研究,本实验主要是模仿临床毛发移植过程,通过在体外对毛囊单位移植物施加不同的处理,包括将毛囊单位修剪成不同大小的移植物和用毛发移植专用器械对毛囊单位的不同部位进行定量的挤压,然后通过器官培养来观察这些处理因素对毛囊生长的影响。通过实验提供的具体数据,可以为临床毛发移植提供一个相对准确的量化标准,以便提高临床中毛发移植的成活率,增加移植密度,同时也降低移植难度,以便于中小医院在临床推广应用毛囊单位移植技术。1.毛囊单位在体外被修剪成不同大小的移植物,根据其外根鞘保留的结缔组织厚度进行分组,然后体外行器官培养,6天后通过光镜下观察其大体形态学变化,HE染色后光镜下观察其组织学变化,同时计算毛囊单位的生长率和毛干的生长长度,根据上述检测指标判断毛囊单位的大小对其生长的影响。2.基于上一实验结果,用毛发移植专用镊子分别夹持毛囊单位移植物的毛球部(A组)和隆突部(B组)10秒钟,C组是对照组,然后行体外器官培养,6天后通过光镜下观察其大体形态学变化,HE染色后光镜下观察其组织学变化；计算毛囊单位的生长率和毛干的生长长度,根据上述检测指标判断受力部位的不同对毛囊单位生长的影响。1.标本的来源及制备标本取自临床毛发移植患者捐献的全厚头皮,标本离体后立即放入盛有0℃生理盐水的无菌培养皿中。在超净工作台内,消毒标本并用0℃生理盐水反复冲洗后,顺毛干方向将头皮切成宽0.3-0.5 cm宽的小头皮条,并将其置于0℃生理盐水中。参照Limmer法,用11号尖刀片在10-20倍体视镜下将其分离成单个毛囊。分离完成后用眼科剪将长出于表皮的毛干剪去,以便于测量毛干生长的长度,整个过程完全模拟临床手术。为了保证实验的均衡性,从分离所得的毛囊中,按照一定的纳入和排除标准挑选符合要求的毛囊纳入实验。2.实验分组①将分离所得到的毛囊依据毛囊外根鞘周围保留的保护组织厚度进行分组,以0.3 mm为一个标准单位(该数值可以通过11号手术刀片刀背厚度估量)随机分为A、B、C组,各组的保护组织厚度分别为0 mm、0.3 mm和0.6 mm；②在上个实验基础上,将分离好的毛囊单位随机分为A、B、C三组,然后分别用毛发移植专用镊子在时间和力度恒定条件下分别夹持其毛乳头(A组)、隆突部(B组),C组为不做任何处理的对照组。3.检测指标将分离所得毛囊单位分批分组的进行器官培养,每天用倒置显微镜观察毛囊的形态学变化,器官培养6天后从各组中随机挑选部分毛囊进行HE染色行组织学观察,并分别计数各组毛囊单位中的毛干生长率,测量毛干生长长度,应用SPSS13.0统计分析软件进行数据处理。行×列表资料采用χ2检验；多组均数比较时如方差齐性,采用单因素方差分析(one-way ANOVA)及Bonferroni两两比较；多组均数比较如方差不齐,采用Welch近似方差分析及Dunnett’sT3两两比较。整理后数据均以x±S表示,所有统计分析中,检验水准α=0.05。1.器官培养的6天后,各组毛囊单位的形态均无明显改变；HE染色后在普通光学显微镜下可清晰观察到三组毛囊组织学无明显变化；A、B、C三组毛干的生长率分别为81.5%、91.7%、92.6%,三组间的差异具有统计学意义(χ2=8.116,P=0.017),A组毛干生长率低于B、c组；在有毛干生长的毛囊中,三组毛干的平均生长长度分别为(1.24±0.10)、(1.36±0.10)、(1.36±0.12)mm,三组毛干平均生长长度间的差异具有统计学意义(F=38.259,P=0.000),A组和B组的差异具有统计学意义(P=0.000),A组和C组间的差异具有统计学意义(P=0.000),B组和C组间的差异无统计学意义(P=0.969)A组毛干的平均生长长度小于B、C组毛干的平均生长长度。2.器官培养的6天后,倒置显微镜下观察到三组毛囊的生长均主要表现为毛干的延长,内根鞘和外根鞘变化不明显,真皮鞘则无明显变化；HE染色后在普通光学显微镜下可清晰观察到三组毛囊组织学无明显变化；A、B和C三组毛干的生长速度以第1、2天最快,以后逐日降低,但是A组的生长速度要低于B和C组。A、B、C三组毛囊中毛干的生长率分别为75.6%、90.0%、92.2%,三组间的差异具有统计学意义(χ2=12.189,P=0.002),A组毛干生长率低于B、C组；在有毛干生长的毛囊中,三组毛干的平均生长长度分别为(1.11±0.11)、(1.26±0.09)和(1.29±0.10)mm,三组间的差异具有统计学意义(F=62.692,P=0.000),A组和B组的差异具有统计学意义(P=0.000),A组和C组间的差异具有统计学意义(P=0.000),B组和C组间的差异无统计学意义(P=0.101)。1.我们是首个以定量的方式来探讨毛囊修剪大小对其生长的影响的实验研究。我们的结果证实：毛囊如果完全裸露会影响其活性,其毛干的生长率和生长长度会明显降低；虽然本实验结论不知是否在体内依然适用,但就体外实验而言,毛囊的外根鞘周围留有0.3mm厚度的保护组织就可以保证其成活率；同时,又可以增加单次的移植密度。由于0.3 mm的厚度很薄,因此该厚度不适合在裸视下去分离毛囊。2.我们的实验是首个以定位和定量的方式探讨,在恒定条件下对毛囊单位不同部位所施加的外力对其生长的影响。同时,我们的实验结果再次提示,在毛发移植过程中要小心操作,尤其是不要粗鲁夹持毛乳头,因为对毛乳头的损伤不仅会降低到毛囊单位的生长率,同时也会降低毛干的生长率,从而对毛干的生长长度造成不良影响。本实验是在体外进行的,对于体内而言,由于植入的毛发都要经历一个脱落期后再重新长出毛干,该结论是否适用于体内,尚需进一步探讨。