内嗅皮质在不同方式应激反应中的作用研究

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目的:探讨内嗅皮质在急性复合应激反应和急性心理应激反应中的作用,并比较不同应激源对下丘脑室旁核c-Fos表达的影响。材料和方法:1.实验动物:健康雄性Sprague-Dawley (SD)大鼠,体重280±20g,每笼5只于浙江大学实验动物中心常规饲养。2.实验试剂:(1)鹅膏氨酸、台盼蓝;(2)兔抗鼠多克隆c-Fos抗体;(3)即用型SABC试剂盒,DAB底物试剂盒,正常山羊血清。3.实验方法:所有实验动物在饲养一周后随机分为7组:正常对照组(N)、急性足底电击组(F)、生理盐水注射双侧内嗅皮质+急性足底电击组(FC)、鹅膏氨酸损毁双侧内嗅皮质+急性足底电击组(FS)、急性束缚应激组(R)、生理盐水注射双侧内嗅皮质+急性束缚应激组(RC)、鹅膏氨酸损毁双侧内嗅皮质+急性束缚应激组(RS)。用鹅膏氨酸化学损毁FS、RS组大鼠双侧内嗅皮质,术后2周,对F组、FC组和FS组建立不可逃避的急性足底电击应激模型,对R组、RC组和RS组建立急性束缚应激模型(N组大鼠不遭受应激),采用c-Fos免疫组织化学方法,观察急性足底电击1小时后及急性束缚应激1小时后下丘脑室旁核快反应基因c-Fos的表达情况,并比较急性足底电击应激和急性束缚应激对下丘脑室旁核c-Fos表达的影响。用SPSS16.0统计软件对实验数据进行统计分析。c-Fos实验数据采用非参数检验的Kruskal-Wallis H检验,以P<0.05为判断差异显著性的标准。结果:(1)损毁大鼠双侧内嗅皮质能抑制不可逃避的急性足底电击应激反应时PVN c-Fos的表达;(2)再次验证损毁内嗅皮质能抑制急性束缚应激时PVN中c-Fos的表达;(3)急性足底电击应激和急性束缚应激诱导的PVN c-Fos的表达无显著差异。结论:(1)不可逃避的急性足底电击模型既有躯体应激成分也有心理应激成分,证明内嗅皮质参与急性复合性应激反应时HPA轴的功能调节。(2)束缚应激作为一种较好的心理应激模型,证明内嗅皮质参与急性心理应激反应时HPA轴的功能调节。结合内嗅皮质在复合应激反应中的作用,提示内嗅皮质至少参与厌恶性刺激的某些方面的信息处理过程,比如情绪部分。(3)不同应激源诱导的PVN c-Fos的表达可能与应激源的控制性有关;(4)综合本课题组以往的研究,我们得出内嗅皮质功能与生理应激和心理应激均关系密切,但具体的调节机理有待进一步研究。
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