天灸对Lewis肺癌化疗小鼠肿瘤转移抑制基因表达及其免疫功能的影响

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肺癌在我国发病率很高,但肺癌患者的 5 年生存率只有 10%,约 70-80%的肺癌患者接受化疗。因抗癌药物治疗指数狭小所引起的不良反应往往限制了癌症治疗的最佳用药。因此防治化疗反应越来越受人们重视,本实验通过研究移植性Lewis肺癌小鼠经天灸治疗和顺铂化疗后机体的免疫功能和肿瘤转移抑制基因的表达了解天灸在肺癌治疗过程中的增效减毒作用。 本实验将 C57BL/6J 近交系小鼠常规饲养 3 天后,随机分成 5 组,正常组,模型组,化疗组,天灸组,天灸+化疗组。正常和模型组不治疗,其余三组采用不同的治疗方法,通过观察小鼠的饮食、体重及整体情况,研究天灸对肺癌化疗小鼠的减毒作用。 本实验采用 MTT 法检测 Lewis 肺癌化疗小鼠脾脏 NK 细胞活性,采用放射免疫分析法检测 Lewis 肺癌化疗小鼠外周血白细胞介素-2(IL-2)水平,研究天灸对小鼠免疫功能的影响。 本实验采用免疫组织化学法和定量逆转录多聚酶链反应法(RT-PCR)检测Lewis 肺癌化疗小鼠肿瘤转移抑制基因(nm23-M1)的蛋白及 mRNA 表达,探讨天灸对肺癌化疗小鼠的增效机理。 通过观察天灸膏贴敷肾俞穴前后各组小鼠指标的变化,并将治疗组与正常和模型对照组进行比较,获得以下结论: 1.正常组、模型组、天灸组三组的鼠重均大于化疗组、天灸+化疗组,化疗组鼠重最轻;正常组、模型组、天灸组三组分别与化疗组、天灸+化疗组比较均有显著差异;化疗组和天灸+化疗组比较也有统计学差异。化疗组和天灸+化疗组的饮食量从第四天开始下降,但天灸+化疗组饮食量大于化疗组。 说明使用顺铂化疗药将导致肺癌小鼠体重减轻,食欲降低,饮食量减少,而天灸可以减轻这一毒副作用。 2.从肿瘤重量、抑制率分析可以看出,三个治疗组与模型组比较,都有统计学差异;天灸+化疗组瘤块重量最小,依次是化疗组、天灸组,未经治疗的模型组瘤块最大,说明化疗组、天灸组和天灸+化疗组对移植性 Lewis 肺癌均有明显的抑制作用,而天灸+化疗组抑制率最大,达到 36.0%。从瘤组织 HE 染色观察,天灸+化疗组出现多处核固缩、碎裂和空泡。说明天灸有加强化疗对小鼠肺癌的生长抑制作用。 3.实验结果显示天灸组的 NK 细胞活性最强,与各组比较均有统计学意义。天灸组小鼠血清 IL-2 含量与正常组、模型组比较都有统计学差异,天灸+化疗组与模型组比较也有统计学差异,天灸+化疗组血清 IL-2 含量略高于化疗组。说明天灸疗法可以使小鼠血清 IL-2 含量升高,脾脏 NK 细胞活性增强,天灸对肺癌化疗小鼠免疫功能有调节作用。 4.治疗后检测各组 Lewis 肺癌小鼠的 nm23-M1基因的蛋白和 mRNA 表达,统计学分析得出,天灸+化疗组 nm23-M1基因的蛋白表达最多,与模型组比较差异显著;说明天灸+化疗对肺癌小鼠 nm23-M1基因蛋白表达有促进作用;天灸和天灸+化疗的治疗方法能明显促进 Lewis 肺癌小鼠 nm23-M1基因的 mRNA 表达;从基因的角度证明天灸对顺铂化疗的增效作用。但从肺脏表面的肿瘤转移结节肉眼计数分析,各组比较均没有统计学意义。
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