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1通过创面皮肤缺损游离植皮后结合负压封闭引流技术(vacuum sealing drainage, VSD)与油砂碎纱布打包方法的对比,探讨两者在术后感染控制效果、皮片成活率、住院时间长短及住院总费用等方面的区别。2通过监测两组动物模型缺损创面植皮后局部形成的肉芽组织中血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)蛋白表达量的变化,从而更好地解释人创面皮肤缺损植皮后结合VSD的应用提高所植皮片成活率的机制,同时为封闭负压引流技术的临床应用提供理论依据。方法1临床标本收集:选择我院两个骨科2009年2月到2010年10月收治的难治性创伤患者85例,单号入院的42例患者进入治疗组,双号入院的34例患者进入对照组,其中9例中途退出两治疗组。合并糖尿病、恶病质、身体其他部位存在慢性感染或不愿意进入及中途退出本治疗组者,3个月内合并有身体其它部位的损伤,受伤前2周内接受过抗菌药物治疗者排除在本次研究过程。入院后先给予清创处理,进入治疗组的42例患者待创面肉芽组织新鲜后取自体0.1～0.2mm厚的整张或多张自体刃厚皮片进行植皮,术后结合负压封闭引流技术处理;进入对照组的34例患者,待创面肉芽组织新鲜后采用传统植皮后油砂碎纱布打包的方法治疗。对他们在平均住院天数、拆包时间、植皮感染率、植皮愈合率、皮下血肿发生率、植皮后换药次数、应用抗生素费用及住院总费用等方面进行比较。2本实验应用VSD及油砂碎纱布打包方法对两组皮肤缺损并植皮后的大白兔模型进行处理,采用蛋白印迹(Western blot)法监测两组创面所植皮片下形成的肉芽组织或愈合组织中VEGF蛋白的相对表达量及对比情况;并用毫米方格纸法计算两组创面的愈合速度。结果1.应用负压封闭引流技术治疗的42例患者,无全身及局部毒性、过敏反应,拆包后取创面渗出物做细菌培养,结果3例感染,占7.14 %。在术后6~8天去除VSD敷料后发现所植皮片色泽正常、血供丰富,仅4例皮片边缘出现少许坏死,经换药处理,创面全部愈合,术后12~14天拆线,所植皮片全部成活,患肢运动功能及外观恢复良好。术后3~12个月随访患处功能良好,植皮外观满意。对照组应用油砂碎纱布打包方法治疗的34例患者,8~12天后拆包,取创面渗出物做细菌培养,结果23例感染,感染率67.65%,导致最终3例皮片皮下化脓坏死;4例出现皮片下血肿,导致皮片全部坏死,占11.76%;18例部分皮片存活68%~82%。与对照组相比,在平均住院天数、植皮愈合率、换药次数及抗生素费用等方面均有显著性差异。2(1)用Western blot法检测实验组、对照组及空白对照组创面肉芽组织中VEGF蛋白的相对表达水平(RI):VEGF蛋白在实验组及对照组1d、3d、5d、7d、10d、14d创面肉芽组织中的相对表达量分别为0.37±0.03,0.85±0.07,1.03±0.13,1.12±0.21,0.96±0.36,0.77±0.25;0.32±0.03,0.43±0.22,0.58±0.18,0.65±0.20,0.74±0.14,0.73±0.11;空白对照组为0.28±0.73。(2)从RI比值来看,VSD组创面肉芽组织中VEGF蛋白表达量在伤后第3天就表现出显著的升高趋势(P <0.05),随后保持在一个相对较高的水平,到第7天达到峰值,第10天开始下降,但仍保持较高的浓度;而油砂碎纱布打包组创面肉芽组织中VEGF含量随着时间的推移也出现升高趋势,但是总体水平与VSD组相比相对较低,从伤后第10天至伤后14天的变化呈现一个平台期,没有显著性变化。(3)实验组在伤后第3d、5d、7d、10d四个时相点创面组织中VEGF蛋白含量相对表达值均显著高于对照组(P <0.05),而在伤后第1d、14d实验组与对照组创面肉芽组织中VEGF蛋白含量的相对表达水平未显示出显著性差异(P >0.05)。(4)在伤后第1天,实验组创面肉芽组织中VEGF蛋白含量与空白对照组(0.28±0.73)相比即显示出显著性差异(P <0.05),而对照组与空白对照组相比差异不显著(P >0.05);在伤后第3d、5d、7d、10d、14d实验组与对照组两组创面肉芽组织中VEGF蛋白的相对表达水平与空白对照组相比均明显升高,显示出显著的统计学意义(P <0.05)。3创面愈合情况:创面形成即刻和第3天、第7天,两组创面面积无显著性差异(P>0.05),第5天,第10天和第14天两组创面面积分别为(11.33±0.28)cm2和(12.03±0.43) cm2, (9.27±0.45) cm2和(8.97±0.59) cm2,(10.89±0.26) cm2和(10.43±0.36) cm2,差异有统计学意义(P<0.05)。结论1.全身大面积皮肤缺损二期游离植皮后结合VSD处理,能在更好地进行创面引流,促进所植皮片更好地贴附,降低皮下血肿及感染的发生,有利于皮片的成活,是治疗全身皮肤缺损很好的方法。2.创面大面积缺损植皮后结合VSD技术的应用,能显著提高创面中VEGF蛋白的表达量,比常规植皮后油砂碎纱布打包的方法创面中VEGF蛋白的表达量要显著提高,而且还能显著促进创面面积缩小。