论文部分内容阅读
目的:白细胞介素18(IL-18)和白细胞介素12(IL-12)是具有多种生物学功能的炎症因子,近来发现两者在动脉粥样硬化(As)斑块中过量表达。本文观察IL-18和IL-12对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞ATP结合盒转运体A1(ABCA1)表达和胆固醇流出的影响,并探讨两者的协同效应及其调节ABCA1介导的胆固醇流出的相关机制。方法:THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞经不同浓度IL-18(0,2,20,200 ng/ml)或IL-12(0,0.2,2,20 ng/ml)处理或者用2ng/ml IL-12和20 ng/ml IL-18共处理不同时间(0,6,12,24h);运用液体闪烁计数器检测细胞内胆固醇流出,高效液相色谱分析细胞内总胆固醇、游离胆固醇和胆固醇酯含量,实时荧光定量PCR检测IL-18R、IL-12R、ABCA1和LXRαmRNA表达情况,Western印迹法检测IL-18R、ABCA1、LXRα及核内NF-κB p65蛋白质的表达水平。以IL-18R抑制剂IL-18结合蛋白(IL-18BP)和NF-κB抑制剂对甲苯磺酰-L-苯丙氨酸氯甲基甲酮(N-p-Tosyl-L-phenylalanine chloro- methyl ketone, TPCK)预处理细胞3h再加入IL-18/IL-12共处理细胞24小时,观察对ABCA1及其介导的胆固醇流出的影响。结果:IL-18和IL-12单独处理THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞并不明显影响细胞总胆固醇、游离胆固醇、胆固醇酯含量及细胞内胆固醇流出,但IL-12预处理或IL-18/IL-12共处理后呈浓度和时间依赖性抑制ABCA1 mRNA及蛋白质的表达,核内NF-κB p65蛋白质的表达水平增加,用IL-18BP和TPCK预处理细胞后,IL-18/IL-12的这种作用被抑制。IL-12促进IL-18R表达,但LXRαmRNA和蛋白质的表达均不受IL-18/IL-12的影响。结论:IL-18/IL-12共刺激下调THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1的表达和细胞内胆固醇流出,促进细胞内脂质蓄积,IL-18R和NF-κB信号途径介导了IL-18对ABCA1的抑制作用,而IL-12通过促进泡沫细胞IL-18R表达参与了IL-18对ABCA1的抑制作用。