重组ETEC K88干酪乳杆菌是一种用来预防仔猪大肠杆菌腹泻的活载体口服疫苗候选菌株，并兼有乳酸菌的益生功能,在体内能够发挥许多生理功能。乳清蛋白不仅是一种营养丰富的蛋白质原料，而且具有许多功能性作用。将二者优势结合起来以求研制出一种兼具预防和营养功能畜用口服液制剂。因此本文对乳清浓缩蛋白制备重组ETEC K88乳酸菌口服液的生产工艺进行了初步研究，并对重组菌口服液的免疫效果进行了本体靶动物临床试验，为工业化生产预防仔猪腹泻口服液疫苗提供必要理论和技术基础。本试验对重组干酪乳杆菌代谢产物的抑菌效果进行了研究。利用牛津杯法研究了干酪乳杆菌代谢产物在不同pH值、热稳定性和胃蛋白酶处理条件下，对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的抑制效果。结果表明重组乳杆菌的代谢产物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌均有明显抑制作用，在pH值2.0～4.0时有抑菌活性，并且代谢产物对热稳定，其活性不被蛋白酶破坏。通过单因素试验考量了接种量、起始pH值、培养方式和培养基浓度及有机酸对ETEC K88基因工程干酪乳杆菌生长繁殖的影响。条件优化后培养条件：培养基浓度为4%，接种量4%，间接接种方式，培养基初始pH值6.6，转速80r/min，进行5次重复实验得到重组菌活菌数的平均实测值为5.9×109cfu/mL。对重组菌口服液在存放过程中的稳定性和活菌的变化情况进行检测,结果表明在4℃的条件下，培养重组菌后乳清蛋白培养基可以延长重组菌的保存时间，且外源基因表达稳定。用重组菌口服液制剂饲喂哺乳仔猪和妊娠母猪，定期采集免疫仔猪的血液、粪便和免疫母猪的初乳和乳汁，利用间接ELISA法检测血清中IgG、IgA抗体、以及乳汁和粪便中特异性slgA抗体水平。结果显示，新生仔猪连续灌服5d和10d重组菌制剂后，检测到血清中含有特异性IgG、IgA，粪便中也检测到特异性slgA抗体，这表明重组菌能够诱导仔猪产生系统免疫和黏膜免疫。妊娠母猪口服重组菌后，乳汁中sIgA抗体水平也有明显升高。通过临床观察，无论是连续口服5天还是10天，口服免疫重组菌制剂都可以有效的预防仔猪ETEC腹泻的发生。另外，该重组菌制剂在促进仔猪的生长发育和治疗腹泻方面具有较好的效果。