【摘 要】
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目的:通过对新生Sprague-Dawley(SD)大鼠海马组织进行体外培养扩增,获得一定数量的神经祖细胞(Neural progenitor cells, NPCs),观察NPCs的生长情况,分析表皮生长因子(EGF)、
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目的:通过对新生Sprague-Dawley(SD)大鼠海马组织进行体外培养扩增,获得一定数量的神经祖细胞(Neural progenitor cells, NPCs),观察NPCs的生长情况,分析表皮生长因子(EGF)、成纤维生长因子(bFGF)、白血病抑制因子(LIF)独立或联合应用对NPC增殖的作用。方法:机械法分离新生SD大鼠海马组织后培养3代获得EGF/bFGF敏感的NPCs,等分为6个实验组分别添加EGF、bFGF、EGF+LIF、bFGF+LIF、bFGF+EGF、bFGF+EGF+LIF继续培养,第9代末(60 d)细胞鉴定并计数,对细胞数量进行比较。结果:(1)机械法分离得到的NPCs可以在体外以悬浮神经球的方式长期培养扩增;(2)EGF、EGF+LIF组NPCs培养到第6代末无法继续传代培养;其余4组继续传代培养到第9代末仍可见Nestin抗体阳性的神经球形成,并且有分化为三种神经终末细胞的潜能;(3)细胞培养第9代末,EGF+bFGF组较bFGF组细胞数量多,但bFGF、bFGF+LIF组之间和EGF+bFGF、EGF+bFGF+LIF组之间细胞数量的差异没有统计学意义(P>0.05)。结论:SD大鼠NPCs可以在体外长期增殖传代,其以悬浮神经球的形式生长,并有分化潜能;对体外培养的SD大鼠NPC,EGF和bFGF联合应用的增殖刺激作用大于单独应用EGF或bFGF,单独应用bFGF的作用大于单独应用EGF;LIF对体外培养的SD大鼠NPC增殖无作用。
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