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目的原发性高血压(Essential hypertension,EH)是临床常见的慢性疾病,全球高发,以血压持续升高为主要表现,但其发病原因及发病机制还未能做出明确阐述。该病一旦确诊,常需终生服用降压药物。而目前常使用的降压药物,在稳定血压的同时,常伴有诸多副作用,如增加糖尿病发生率等。中医对高血压无明确记载,但根据其头晕、头胀、易激动等临床常见表现,可将该病归于肝阳上亢证,并以此进行治疗。研究表明,针刺疗法作为中医疗法的一部分,可有效降低血压。针刺治疗与西医学降压药物相比,几乎无副作用,使用简便廉验,可在一定程度减轻高血压患者经济负担。在高血压发病过程中,会出现心、脑、肾损伤,因此在治疗高血压同时,应关注该病对相应靶器官带来的损害,及时采取措施,保护靶器官。其中,高血压与脑保护已经成为当今时代临床密切关注的问题,且前期课题组在针刺降压的研究中,已通过脑组织形态学得出针刺降压同时可以产生脑保护作用,但其具体机制研究较少。目前研究发现,海马既可因血压升高发生萎缩,但通过相关治疗干预后,海马又可通过相关生物学途径起到降压作用。因此,本研究选用自发性高血压大鼠(SHR)为研究对象,以针刺捻转补泻为干预方法,通过比较各组大鼠血压变化情况,运用Elisa检测海马糖皮质激素受体(GR)及外周血清中下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴(HPA)各组分表达,以及采用Label free、PRM蛋白组学方法,筛选并验证海马中蛋白表达情况,分析针刺捻转补泻手法中枢降压机制,旨在为针刺治疗高血压提供新的理论依据。方法42只雄性SHR随机等分为模型组(M)、捻转补法组(B)、捻转泻法组(X),14只WKY大鼠作为空白对照组。各针刺组分别采用针刺捻转补法、针刺捻转泻法干预双侧太冲穴,模型组和空白组不做针刺处理,只给予相应抓捉固定,每日治疗一次,每次20分钟。各组于针刺前1天及针刺第2、6、8、12、14天使用无创血压仪测量尾动脉血压。干预结束后,腹主动脉取血,断头取脑并分离海马组织,采用HE染色法观察海马组织形态学变化,Elisa法检测海马糖皮质激素受体(GR),血浆促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质醇(CORT)的表达,运用Label free和PRM蛋白组学技术检测各组海马差异蛋白表达。结果1各组大鼠治疗前后血压变化与空白组比较,其它各组大鼠尾动脉收缩压在针刺前及针刺后均显著升高(P<0.01)。与模型组比较,治疗第6天,泻法组收缩压明显下降(P<0.05);治疗第8天,补法组收缩压明显下降(P<0.05),泻法组收缩压显著下降(P<0.01);治疗第14天,补法组收缩压显著下降(P<0.01)。与补法组比较,治疗第12天,泻法组收缩压明显下降(P<0.05);治疗第14天,泻法组收缩压显著下降(P<0.01)。2各组大鼠海马CA1区形态变化HE染色结果显示,空白组神经元结构完整,细胞形态规则,细胞间隙正常,核仁清晰;模型组染色变浅,神经元萎缩,排列疏松,出现核固缩;补法组神经元丢失,细胞形态改变,部分细胞结构退化;与补法组比较,泻法组神经元较紧密,核仁清晰,细胞结构较完整。3各组大鼠海马GR及HPA轴各组分含量变化与空白组比较,模型组大鼠海马GR的表达明显升高,差异有显著统计学差异(P<0.01);与模型组比较,补法组和泻法组大鼠海马GR表达均降低,差异有统计学意义(P<0.05);与补法组比较,泻法组海马GR表达降低更明显,差异有统计学意义(P<0.05)。总体结果显示,各组大鼠海马GR表达由小到大依次为空白组<泻法组<补法组<模型组。与空白组比较,模型组大鼠血浆ACTH、CORT、CRH均显著升高(P<0.01);与模型组比较,补法组和泻法组大鼠ACTH、CORT、CRH均明显下降(P<0.05,P<0.01);与补法组比较,泻法组大鼠ACTH、CRH有所下降(P<0.05)。4各组大鼠海马中差异蛋白表达情况通过非标记定量Label Free技术对海马蛋白组学进行研究,共检索到1163个差异蛋白。与模型组比较,空白组差异蛋白有314个,其中上调的有123个,下调的有191个,补法组差异蛋白有48个,其中上调的有25个,下调的有23个,泻法组差异蛋白有82个,上调的有45个,下调的有37个;与空白组比较,泻法组差异蛋白有330个,其中上调的有144个,下调的差异蛋白有186个,补法组差异蛋白有319个,其中上调的差异蛋白有132个,下调的有187个;补法组与模型组比较,差异蛋白有70个,其中上调的有33个,下调的有37个。经GO功能及各组间差异蛋白富集分析,海马蛋白功能主要与细胞过程、生物调节、代谢过程、细胞器、膜、蛋白质复合物、催化活性等密切相关。对海马蛋白进行KEGG功能分析,海马蛋白表达与神经系统、免疫系统、内分泌系统、物质依赖、神经退行性疾病、心血管疾病、运输和分解代谢等密切相关。对各组差异蛋白进行KEGG富集分析,发现经过针刺捻转补泻手法干预,肾素-血管紧张素系统被抑制,推断该通路为降压的重要途径之一。进一步对各组大鼠海马肾素-血管紧张素相关蛋白进行PRM验证,得到血管紧张素原(AGT)、血管紧张素转化酶(ACE)和肾素原受体(Atp6ap2)经过针刺捻转补泻手法干预均明显下调。结论针刺双侧太冲穴,并施以捻转补泻手法,可有效降低自发性高血压大鼠血压,并且对海马产生脑保护作用。其作用机制可能是通过针刺对海马-HPA轴产生作用,改善海马中糖皮质激素受体(GR)表达,抑制HPA轴表达,减少血浆中ACTH、CORT、CRH分泌,同时激活与调节血压有关的蛋白途径,达到中枢-外周协调降压作用。