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目的:探索细胞因子TNF-α、NGF、IGF-1以及稀土(氯化钇)、粉防己碱对表皮细胞生长与凋亡的影响,旨在为创面修复、皮肤病治疗提供新的药物选择与依据。 方法:1、采用胰蛋白酶消化法分离大白鼠乳鼠表皮细胞。 2、建立紫外线诱导表皮细胞凋亡模型,用电镜观察、流式细胞仪与TUNEL法检测细胞凋亡,确定紫外线照射与细胞凋亡的关系。 3、将细胞数1×10~5/孔接种96孔培养板,分为6组,每组分别加入两种不同浓度的TNF-α、NGF、IGF以及稀土(氯化钇)、粉防己碱,对照组加入生理盐水,72小时后,用MTT法检测表皮细胞存活率及TUNEL法检测表皮细胞凋亡率。 4、将细胞数1×10~5/孔接种96孔培养板,分组同上。细胞培养72小时后,紫外线照射表皮细胞,然后每组分别加入两种不同浓度的TNF-α、NGF、IGF以及稀土(氯化钇)、粉防己碱,对照组加入生理盐水,培养48小时后,收集细胞,用MTT法检测表皮细胞存活率及TUNEL法检测表皮细胞凋亡率。 结果:1、紫外线照射能诱导表皮细胞凋亡,TUNEL法与流式细胞仪检测结果大致相同。 2、NGF、IGF促进表皮细胞生长与存活,作用为IGF大于NGF,且对 紫外线照射后表皮细胞作用更为显著。”)N F a、稀上(氯化忆人 粉防c碱 抑制表皮细胞生长,作用大小顺序为TNF川、粉防己碱、稀上,巳对正常 生长表皮细胞作用更为显著。各因素对表皮细胞生长影响均七浓度无关。 3。*N卜。、稀土(氯化钮*粉防已碱促进表皮细胞凋0’:,对正常表皮 细胞作用更显著。1*F、*GF抑制表皮细胞凋亡,对照射后表皮细胞作用更 显著。各因素对表皮细胞凋亡影响与浓度无关。 丞(. 结论:1气 紫外线照射能诱导表皮细胞凋亡; 2、1*F、**F促进表皮细胞生长,抑制表皮细胞凋L:,作用为mr大 *NGF,对紫外线照射后表皮细胞具有显著的保护作用: 3、TNF Q、稀上(氯化妃L粉防c碱抑制表皮纲胞牛K,促进表皮圳 胞凋亡,作用大小顺序为*N卜u、粉防己碱、稀土(氯化钻),K对小常表 皮细胞作用更显著。