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几丁质(β-1.4-乙酰葡萄糖胺线形同聚物)是病原真菌细胞壁的主要成分，几丁质酶通过破坏病原真菌菌丝尖端新合成的几丁质，使病原真菌细胞壁中的几丁质降解；破坏细胞新物质的沉积，致使病原体死亡，且所产生的细胞壁碎片具有诱导物作用，可激发寄主植物的抗病反应。植物几丁质酶具有广泛的生理活性，尤其在植物抗病性方面具有重要作用，植物几丁质酶基因工程成为目前抗真菌基因工程研究热点之一。 本文以人参为材料，首次从中克隆了ClassⅢ几丁质酶基因，并进行了序列分析，研究了该基因在大肠杆菌中的表达情况，其主要结果如下： 1．通过RT-PCR与反向PCR方法，从人参中克隆到一个ClassⅢ几丁质酶基因，并进行测序，全长为1432bp，其中包含完整的开放阅读框即从第272位的起始密码子到第1169位的终止密码子，推测编码蛋白的氨基酸序列含298个氨基酸残基，无内含子，并在GenBank上注册(DQ532359)； 2．人参ClassⅢ几丁质酶基因与其它植物ClassⅢ几丁质酶基因在核苷酸和氨基酸水平上有很高同源性；通过对人参ClassⅢ几丁质酶基因的系统发育树分析得出，人参ClassⅢ几丁质酶和其它植物的ClassⅢ几丁质酶具有共同的起源；Class Ⅰ、Class Ⅱ和ClassⅣ几丁质酶来源于同一祖先，而ClassⅢ与ClassⅤ几丁质酶来源于同一祖先。 3．人参ClassⅢ几丁质酶基因编码一酸性几丁质酶，等电点pI为4.55，预测分子量为31.4KD；人参ClassⅢ几丁质酶氨基酸序列含有两个功能区域即N-端信号肽区和糖基水解酶18家族催化区；人参ClassⅢ几丁质酶蛋白的催化区内，144-152为几丁质酶18家族的活性位点，序列为LDGVDFDIE，活性中心为E(Glu)；人参ClassⅢ几丁质酶蛋白的成熟位点在第25—26的Ala—Gly之间； 4．用同源建模法模拟出人参ClassⅢ几丁质酶的空间结构模型； 5．将人参ClassⅢ几丁质酶基因亚克隆到大肠杆菌的表达载体PET-28a(+)中，并转入大肠杆菌BL21中，SDS-PAGE分析初步表明几丁质酶以包涵体的形式表达。