氧化葡萄糖杆菌催化仲醇拆分及其相关酶的研究

来源 :华东理工大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:rtreterter
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
氧化葡萄糖酸杆菌因其不完全氧化糖、醇生成醛、酮、酸的能力,成为生物工业上应用广泛的微生物之一。以往所报道的氧化葡萄糖酸杆菌催化的底物基本属于多羟基的糖醇和伯醇,而作用于这些底物的膜结合脱氢酶也一直是研究的热点。基因组信息显示氧化葡萄糖酸杆菌含有众多的醛酮还原酶、短链醇脱氢酶、锌结合的脱氢酶等家族的氧化还原酶,但其中是否包含具有仲醇氧化活性的酶并不清楚,而利用氧化葡萄糖酸杆菌催化的动力学拆分反应合成手性仲醇的研究至今未见报道。本论文首次通过实验证明了氧化葡萄糖酸杆菌静息细胞可催化仲醇的动力学拆分获得单一构型的仲醇。通过调节反应体系中的关键参数——pH值,分别获得了不同构型的仲醇。实验选择了1-苯乙醇,1-苯基-2-丙醇和4-苯基-2-丁醇等三个模式底物,在酸性条件(pH5)下,静息细胞对于R构型仲醇的选择性要大于S构型,反应结束时主要残留S构型仲醇;碱性条件(pH8)下,底物的选择性相反,最终保留R构型的仲醇。通过条件优化,1-苯乙醇,1-苯基-2-丙醇,4-苯基-2-丁醇的e.e值分别可以达到90%(S),100%(S),100%(R)。在明确氧化葡萄糖酸杆菌静息细胞具有仲醇的选择性氧化特性的基础上,对其中催化该反应的酶进行了初步的鉴定。依据序列等信息,选取了两个可能属于短链醇脱氢酶家族、而功能未知的酶gox2036和gox0525作为研究对象,在E.coli BL21(DE3)中实现了可溶性表达,通过对重组蛋白的底物特异性测定,明确了Gox2036可以选择性地氧化消旋底物中的S构型的仲醇,保留R构型仲醇,为氧化葡糖酸杆菌在碱性条件下负责仲醇催化的主要酶。Gox0525不具备醇氧化活性,与氧化葡糖酸杆菌催化仲醇的反应无关,但它对α-酮羰基化合物、2-酮和酮酯具有较好的还原活性。除了对仲醇的氧化特性外,Gox2036还对脂肪酮、芳香酮、2,3-二酮、羟基酮和酮酯等化合物表现良好的还原特性,尤其是还原α-二酮生成重要的药物前体——手性的羟基酮。
其他文献
通过缩合反应合成了4种含萘环的Salen配体:2-羟基-1-萘甲醛缩1,2-丙二胺(配体Ⅰ),2-羟基-1-萘甲醛缩1,3-丙二胺(配体Ⅱ),2-羟基-1-萘甲醛缩邻苯二胺(配体Ⅲ),2-羟基-1-萘甲醛
目的:研究人参皂苷Rg1对小鼠全脑缺血致白质纤维损伤的影响,阐明人参皂苷Rg1对小鼠全脑缺血的保护作用及其机制。方法:雄性ICR小鼠制备缺血动物模型前灌胃人参皂苷50mg·kg-1
常州市垂柳Salix babylonica上,星天牛Anoplophora chinensis,云斑天牛Batocera horsfieldi和桑天牛Apriona germari混合发生。为降低危害整株柳树的天牛虫口率,根据常州当地
河北省作为京津冀一体化经济发展中的先锋,为打造文化强省的战略构想,公共文化建设飞速发展。与此同时也存在公共文化投入资金不透明、绩效审计缺失、公共文化的绩效评价机制
目的:研究在兰州药用百合鳞片气培繁殖法的基础上使用适量植物生长调节剂促进“牡丹头”优种百合鳞片发芽、生根,快速形成优良母籽。方法:6BA(2.00mg/L)单独使用或6BA+NAA(2.00mg/L+0.6
目的:改善医疗设备的维修现状,确保医疗仪器安全、有效地运行,为临床诊断和治疗提供有力技术保障。方法:回顾性分析上海市肺科医院2013年设备维修费用,探讨综合维修模式的对
介绍了一种疲劳设备保温支撑圈结构,采用ANSYS有限元分析软件对某项目吸附塔上的该结构进行了应力分析及强度和疲劳评定,结果表明,该结构适用于疲劳设备。
目的分析早期气管切开对重型颅脑损伤并发肺部感染的防治作用,为临床工作提供参考信息。方法将保定市第一医院2010年1月至2011年12月诊治的112例重型颅脑损伤患者按照气管切
如何破解企业融资难、融资贵成为了近几年中央经济工作会议的重要议题之一,降低债务融资成本是解决实体经济企业困难、助推供给侧结构性改革的突破口。企业作为供给侧结构性改革的微观主体,肩负着经济责任与社会责任双重使命。企业积极践行社会责任能否降低债务融资成本?信用评级在企业社会责任影响债务融资成本的过程中如何发挥作用?若能为这些问题提供可靠的经验证据,将有利于鼓励企业积极践行社会责任,缓解企业融资难、融资
本研究以紫茎泽兰草粉为载体、薰衣草香精和右旋烯炔菊酯为有效成分、辅以适量吸附剂和赋形剂、采用粉末直接压片法,制备紫茎泽兰基芳香型防蛀缓释剂。通过开放式体外释放实