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目的:用不同浓度的人重组TNF-a刺激早孕滋养细胞,检测其培养基中糖、P、E2、β-HCG值得的变化;TNF-a对早孕滋养细胞增殖的影响;滋养细胞中胰岛素信号蛋白的表达;及TNF-a对滋养细胞中GLUT1、IRS-1蛋白的影响。方法:用孕6-10周做人工流产患者的胎盘组织培养滋养细胞。免疫组化鉴定细胞纯度;根据妊娠期糖尿病患者外周血清中TNF-a的浓度设的梯度20pg/ml、200pg/ml、2000pg/ml、20000pg/ml刺激滋养细胞,检测培养液中含糖量、E2、P、β-HCG的含量;用MTT检测不同浓度TNF-a对滋养细胞增殖的影响;SDS丙烯酰电泳蛋白印记检测葡GLUT1和IRS-1的差异;加胰岛素刺激后,检测浓度是20000pg/ml TNF-a刺激滋养细胞吸收糖的情况。成果:1.培养纯度较高早孕滋养细胞;2.滋养细胞存在GLUT1、IRS-1、ERK、GLUT4的表达;3.TNF-a组与空白组比血糖无统计学差异;在胰岛素刺激下20000pg/ml的TNF-a有促进滋养细胞吸收糖的趋势;4.TNF-a对滋养细胞分泌的β-HCG、P无明显统计学差异;与空白组比200pg/ml,2000pg/ml20000pg/ml对E2的影响有统计学差异(P<0.05),E2的分泌量呈下降趋势;;5.不同浓度TNF-a对早孕期滋养细胞的增殖TNF-α组与空白组有统计学差异(p<0.05);TNF-a组间比无统计学意义;6.TNF-a完全阻断滋养细胞胰岛素信号蛋白IRS-1表达;对GLUT1蛋白表达无明显差异。结论:1.滋养细胞存在GLUT1、IRS-1、ERK、GLUT4的表达;2.TNF-a对滋养细胞增殖有影响;3.TNF-a对滋养细胞分泌的P无统计差异,但P值随TNF-a浓度增加呈上升趋势,TNF-a可能是通过增加滋养细胞分泌P促使IR的产生;4.20pg/ml、200pg/ml、2000pg/ml、20000pg/ml TNF-a不抑制滋养细胞吸收糖;加胰岛素刺激后,20000pg/ml TNF-a有促进滋养细胞糖吸收的趋势,TNF-a通过促进滋养细胞吸收糖,可能有促进胎儿脂肪的发育产生巨大儿作用。5.TNF-a可完全阻断早孕期滋养细胞中IRS-1的蛋白表达。