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苯并[a]芘(Benzo(a)pyrene,B[a]P)和菲(Phenanthrene,Phe)是具有典型“三致”效应的持久性多环芳烃类有机污染物,在土壤中逐步累积,对土壤环境造成潜在的威胁。B[a]P和Phe一次污染条件下,其进入土壤的过程与低剂量逐步累积的污染过程存在一定的差异,会在一定程度上高估B[a]P和Phe的环境风险。本试验采用多次叠加污染和一次污染两种方式,模拟污染物在土壤中逐步累积的过程,研究土壤B[a]P和Phe多次叠加污染的有效性特征及其对蚯蚓体腔细胞超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、过氧化物酶(Peroxidase,POD)活性和丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量的毒性效应。研究结果表明:(1)随着B[a]P和Phe在土壤中培养时间的延长,土壤B[a]P和Phe的有效性(土壤B[a]P和Phe可提取含量、有效含量和蚯蚓富集量)及其对蚯蚓的毒性效应(SOD、POD酶活性和MDA含量)均呈前期(1~28 d)下降较快,后期(28~56d)下降速率逐渐减缓的趋势。(2)土壤B[a]P和Phe有效含量(Tenax法)比分别比土壤B[a]P和Phe可提取含量(ASE法)低37.36%~79.59%和79.72%~89.76%(p<0.05);并且蚯蚓B[a]P、Phe富集量与土壤B[a]P、Phe有效含量(Tenax吸附提取量)之间呈极显著正相关(P<0.01),相关系数(R2)为0.927和0.935 8。(3)B[a]P多次叠加污染条件下,土壤B[a]P有效含量和蚯蚓富集量分别比一次污染低17.05%~38.60%和22.62%~46.81%(p<0.05);蚯蚓体腔细胞SOD、POD酶活性和MDA含量分别比一次污染低17.34%~50.38%、2.42%~24.48%和1.94%~16.97%(p<0.05)。B[a]P多次叠加污染对蚯蚓的毒性效应低于一次污染。蚯蚓体腔细胞SOD、POD酶活性和MDA含量与土壤B[a]P有效含量的相关系数(R2)分别为0.695 7(SOD)、0.787 5(POD)和0.8728(MDA),与蚯蚓B[a]P富集量的相关系数(R2)分别为0.680 7(SOD)、0.727 1(POD)和0.829 0(MDA);(4)Phe多次叠加污染条件下,土壤Phe有效含量和蚯蚓Phe富集量分别比一次污染低23.19%~50.15%和12.64%~57.89%(p<0.05);蚯蚓体腔细胞SOD、POD酶活性和MDA含量分别比一次污染低3.40%~47.24%、6.49%~38.02%和21.30%~57.82%(p<0.05)。Phe多次叠加污染对蚯蚓的毒性效应低于一次污染。蚯蚓体腔细胞SOD、POD酶活性和MDA含量与土壤Phe有效含量的相关系数(R2)分别为0.893 4(SOD)、0.8709(POD)和0.9305(MDA),与蚯蚓体内Phe富集量的相关系数(R2)分别为0.989 8(SOD)、0.957 1(POD)和0.9727(MDA);本研究结果可为土壤B[a]P和Phe多次叠加污染的毒性效应评价提供理论依据。