抗体技术已经由细胞工程抗体发展到了基因工程抗体.噬菌体抗体库技术的出现及噬菌体抗体的研制成功已成为抗体研究领域的突破性进展之一,该技术被誉为抗体技术的第三次革命,必将为生物技术领域的发展带来巨大的推动.噬菌体抗体库(phage antibody library)技术是通过PCR方法将全套抗体重链和轻链可变区基因克隆出来,克隆至噬菌粒载体上,抗体片段与噬菌体的外壳蛋白以融合蛋白的形式表达在噬菌体的表面,因为在噬菌体表面表达的抗体片段具有与抗原结合的生物学活性,因此,可以用亲和层析的方法从噬菌体抗体库中筛选出目的噬菌体抗体,并可获得特异性噬菌体抗体的基因.获得目的噬菌体可感染合适的大肠杆菌进行分泌型表达,再采用蛋白质L-琼脂糖通过亲和层析方法纯化出具有与抗原结合活性的单链抗体.这一技术将抗体的表型和基因型联系起来,因而使识别抗原的能力与进行再扩增的能力结合在一起,模拟生物体内B淋巴细胞的有关特性--识别与扩增的统一,因而是一种极为高效的表达和筛选抗体的体系.噬菌体抗体库技术是以基因工程技术来生产抗体,它的出现使传统的以细胞工程技术制备单克隆抗体的方法完全改观,与杂交瘤技术相比它具有以下的优点:(1)方法简单、快速:从淋巴细胞中提取mRNA到构建抗体库,继而筛选出目的噬菌体抗体,整个过程一般只需要几周的时间,而杂交瘤技术从脾细胞融合到获得稳定的单克隆抗体细胞株至少需数月.(2)不需要实验动物或大量的细胞培养就可生产抗体.(3)可以绕过免疫制备抗体:由于人淋巴细胞库中天然存在针对各种抗原的特异性细胞,可以直接利用人外周血淋巴细胞构建"天然抗体库",筛选出目的噬菌体抗体,使制备全人抗体成为可能,尤其是制备自身抗原和其他弱免疫原性抗原的抗体具有独到的优势.(4)可以对抗体基因进行改造,在体外通过基因突变、链更替等技术,可进一步提高抗体的亲和力和稳定性.(5)可以制备多克隆抗体:对抗体库进行筛库时,最初得到的是多克隆重组噬菌体抗体.将该多克隆抗体用于诊断可提高敏感度,用于治疗可提高疗效,也是分子识别、抗原表位研究的理想工具.(6)可大规模生产,成本低:抗体片段可在大肠杆菌中进行分泌型表达,易于分离纯化出有生物学活性的抗体分子,通过发酵大量生产.克服了杂交瘤细胞通过单克隆抗体腹水或大规模细胞培养来制备抗体的局限性.(7)噬菌体抗体的保存和传代稳定,而杂交瘤细胞株在传代过程中则有明显的不稳定性.近年来,随着噬菌体抗体库技术的不断发展,人们正在广泛应用该技术研制各种抗体片段.其中,因单链抗体具有许多优点而成为噬菌体抗体研究的热点.单链抗体(Single chain variable fragment,ScFv)是由抗体轻链可变区和重链可变区通过一接头(Linker)连接而组成的,是目前报道最多的一类小分子抗体片段,其分子量仅为完整抗体分子的六分之一,而且还有容易进入病灶组织的周围循环及在肾内清除快等优点,在疾病的诊断和治疗方面已引起广泛重视.此外,由于单链抗体缺少抗体Fc段,只识别靶抗原,不与具有Fc受体的非靶细胞结合,因此在体内定位诊断时背景低、图像清晰,在某些疾病的体内定位诊断方面也具有无可比拟的优点以及巨大的潜在价值.