论文部分内容阅读
牙齿再生是采用人体的组织或细胞,在体外再生出具有正常形态,大小及生物功能的牙齿来取代传统方法用于修复受损牙齿的目的。本篇论文主要采用慢病毒介导技术对提高人牙髓干细胞的牙向分化的潜能进行研究,找出一种在牙髓干细胞牙向分化过程中起重要作用的关键因子,提高牙髓干细胞牙向分化的能力,为牙齿再生的组织工程研究提供种子细胞与方法依据。在本篇论文的研究工作中,我们分离和培养了成人的牙髓干细胞,先后克隆了三种在牙齿发育过程中起重要作用的因子于慢病毒载体上,大量生产并浓缩出高滴度的病毒颗粒对牙髓干细胞进行分组诱导,为后期研究牙髓干细胞牙向分化潜能的工作奠定基础。通过一系列的检测,我们发现:同感染空载病毒相比较,感染携带有目的基因的牙髓干细胞能够表达牙本质细胞特异蛋白DSPP,而过表达了基因MSX1的牙髓干细胞比过表达PAX9和BMP4的牙髓干细胞分泌出更多的DSP,osteocalcin,osteopontin等牙齿结构特异性蛋白;同时被携带有MSX1慢病毒感染的牙髓干细胞碱性磷酸酶活性最高;钙化程度也最高。这表明牙髓干细胞具有在体外被诱导为牙本质细胞的潜能,同时基因MSX1是牙髓干细胞牙向分化过程中的关键因子,过表达基因MSX1对于提高牙髓干细胞牙向分化的能力起到显著作用。