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目的第一部分:通过测定湖北地区汉族器官移植患者人群(分为肾移植和非肾移植两个亚组)和健康人群Nm23基因rs2302254C/T、rs2318785G/A、rs11868380C/G、rs34214448G/T等4个tag SNPs位点基因型、等位基因,Nm23基因m RNA表达水平和其蛋白产物NDPK活性,探索Nm23基因型、m RNA表达量以及蛋白活性在上述人群中的分布特点,研究Nm23基因型-表型间的相关性。第二部分:通过测定湖北地区汉族肾移植患者人群Nm23基因4个SNPs位点基因型及NDPK活性水平,结合部分临床资料,分析肾移植患者人群中Nm23tag SNPs基因型-表型对生化指标的影响。方法湖北地区器官移植患者Nm23 tag SNPs基因型-表型相关性研究:采用病例-对照研究,选择2014年2月至3月间在华中科技大学同济医学院附属同济医院和协和医院门诊进行免疫抑制剂血药浓度监测的器官移植患者604例(314例肾移植患者及290例非肾移植患者),及同阶段华中科技大学同济医学院附属协和医院健康体检志愿者1000例,采用Taq Man-MGB基因分型技术测定这4个SNPs位点的基因型,按一定原则选择其中部分样本应用荧光定量PCR技术测定Nm23m RNA表达量,并沿用本课题组建立的高效液相色谱法法测定人红细胞内NDPK活性。采用SPSS 19.0软件分析Nm23基因型、等位基因及NDPK活性在各试验组中的分布特征、差异及三者间相关性。湖北地区肾移植患者Nm23 tag SNPs基因型-表型对生化指标的影响分析:选择2012年12月至2013年11月间在广州军区武汉总医院临床药理室进行进行血药浓度监测的205例肾移植患者作为研究对象,所有研究对象均有完整的临床资料,包括姓名、性别、年龄、吸烟史、饮酒史、高血压病史、糖尿病病史以及完整的血常规、血生化等体检数据。测定该人群Nm23基因这4个位点的基因型及NDPK活性,采用SPSS 19.0软件分析Nm23基因型及NDPK活性与生化指标间的相关性。结果(1)Nm23基因上所选4个tag SNPs位点均符合Hardy-Weinberg平衡,基因型和等位基因在健康组、肾移植组以及非肾移植组间的分布差异无统计学意义,校正性别、年龄因素后,rs34214448G/T在显性模型条件下TT+GT与GG基因型在健康组与肾移植组之间差异有统计学意义(校正后P=0.039,OR=0.760,95%CI=0.585-0.987)。(2)Nm23 m RNA表达水平在健康组、肾移植组以及非肾移植组间的分布差异没有统计学意义;rs2302254位点不同基因型间纯合子CC携带者Nm23 m RNA表达量显著低于纯合子TT及杂合子CT携带者(P<0.001);rs2318785位点不同基因型间纯合子AA携带者Nm23 m RNA表达量显著低于纯合子GG及杂合子GA携带者(P<0.001);rs34214448位点不同基因型间纯合子GG携带者Nm23m RNA表达量显著低于纯合子TT及杂合子GT携带者(P<0.001);rs11868380位点3种不同基因型间Nm23 m RNA表达量差异无统计学意义(P=0.319)。(3)健康人组与肾移植组,肾移植组与非肾移植组及健康人组与非肾移植组NDPK活性水平差异具有统计学意义(P<0.05),NDPK酶活性水平分布:健康组>非肾移植组>肾移植组;选取的4个tag SNPs位点的基因型与NDPK活性水平无显著相关性;Nm23 m RNA表达量与NDPK活性间无明显相关性。(4)Nm23基因上所选的4个tag SNPs基因型及NDPK活性与TB(总胆红素)、DB(直接胆红素)、AST(谷草转氨酶)、ALT(谷丙转氨酶)、TP(总蛋白)、A(白蛋白)、G(球蛋白)、A/G(白球比值)、BUN(尿素氮)、UA(尿酸)、Cr(肌酐)、Glu(空腹血糖)、CO2CP(二氧化碳结合力)、e GFR(估算的肾小球滤过率)、WBC(白细胞)、RBC(红细胞)、PLT(血小板)、Hb(血红蛋白)、HCT(红细胞压积)等生化指标间的相关性无统计学意义。结论(1)Nm23基因rs34214448G/T位点G等位基因可能会升高慢性肾功能衰竭导致尿毒症或肾实质性病变等肾移植术主要适应证的发病风险。(2)Nm23基因上rs2302254、rs2318785及rs34214448多态性与m RNA相对表达量存在明显相关性。rs2302254-CC、rs2318785-AA和rs34214448-GG可能为使Nm23基因m RNA表达下调的基因型。(3)NDPK活性在健康组与肾移植组、非肾移植组间的水平差异具有统计学意义,NDPK酶活性水平分布:健康组>非肾移植组>肾移植组。NDPK活性可能与机体疾病状态相关。(4)Nm23 tag SNPs基因型-表型对机体的生化指标无显著影响,但有待进一步研究。