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目的:选取与眼眶弥漫大B细胞淋巴瘤生物学特性较为相似的弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞系作为实验对象,观察不同放射剂量和不同作用时间对DLBCL细胞生长的影响及其细胞周期和细胞凋亡的变化,从而初步探讨X射线对DLBCL细胞的作用,进而为其放射治疗提供理论依据。方法:1、DLBCL细胞复苏,观察细胞形态,了解生长情况和特性。2、用0 Gy,2 Gy,4 Gy,6 Gy,8 Gy五种不同剂量分别作用于DLBCL细胞,在6,12,24,48,72,96小时观察DLBCL细胞的形态变化,同时应用MTS/pms比色法观察不同剂量照射后DLBCL细胞在不同时间的OD值,并计算细胞存活分数。3、应用流式细胞仪,分析不同剂量和照射后不同时间对DLBCL细胞的细胞周期和细胞凋亡影响。结果:1、复苏的DLBCL细胞生长良好,传代稳定,细胞形态规则,多呈圆形或类圆形。2、不同剂量组的OD值均低于正常对照组,在同一作用时间内剂量越大,OD值越低。经统计分析,8Gy照射组自6小时起,6Gy照射组自24小时起,4Gy照射组自48小时起,2Gy照射组自72小时起,OD值就与对照组差异具有统计学意义(P<0.05)。不同照射组随着剂量的增大,细胞生长越缓慢。同时随着照射剂量增大,作用时间延长,细胞存活分数下降也越明显。3、细胞周期结果显示,在G2-M期,各照射组在6小时均呈现相对较低的比例(<17%),自12小时开始,各照射组与对照组相比,G2-M期细胞比例逐渐增加,差异具有统计学意义(P<0.01)。同时8Gy剂量组G2-M期细胞比例逐渐升高,直到48小时也未见恢复,而2Gy、4Gy和6Gy剂量组在6-24小时内G2-M期细胞比例逐渐升高,至24小时后开始有所恢复。4、细胞凋亡结果显示,照射剂量越大,细胞凋亡指数越高。同一时间,不同剂量组与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。随着时间延长细胞凋亡指数逐渐增加。5、将细胞周期和凋亡结果综合分析发现,在照射后12h,4Gy,6Gy和8Gy照射组开始出现明显凋亡,并随着时间的延长而逐渐增高。结合细胞周期曲线图,发现G2-M期自12h开始出现明显阻滞,提示凋亡可能主要来源于G2-M期。结论:1、X射线对DLBCL细胞的生长具有抑制作用,并呈明显的剂量依赖性和时间依赖性2、X射线对DLBCL细胞的周期影响主要是产生G2-M期阻滞。照射剂量越大,周期阻滞越严重,阻滞时间也越长。3、随着放射剂量的增加和作用时间的延长,细胞凋亡指数逐渐增高。4、DLBCL细胞在X射线照射后,随着G2-M期的启动,细胞凋亡也相继被启动,从而发生延期的间期凋亡。5、通过对DLBCL细胞周期和凋亡的研究,发现分割放疗以及特异性缩短G2-M期药物的应用可能会对肿瘤细胞起到更大的杀伤作用,从而为DLBCl治疗方案的调整提供了理论依据,并为其综合治疗提供了新的思路和方向。