【摘 要】
：
目的:本研究选取重楼及其单体,旨在探讨通过调控EMT,抑制结直肠癌迁移和侵袭的作用机制,阐明其对结直肠癌转移的抑制作用,为药物靶向作用于结直癌的转移提供实验支持,并为控制结直肠癌的转移提供新的思路与方法。方法:（1）培养人结直肠癌HT29和LoVo细胞株。（2）MTT法检测不同浓度的药物对HT29和LoVo细胞活力的影响,分析药物的IC50值;筛选并选取重楼最敏感单体进行后续实验。（3）平板克隆和
【基金项目】
：
国家自然科学基金青年项目（82104916）-桂楼组分通过RHO GTPases抑制子宫腺肌病内膜细胞EMT的机制研究； 山东省自然科学基金青年项目（ZR2020QH337）-重楼皂苷Polyphyllin的抗膀胱癌细胞转移作用及分子机制研究；
论文部分内容阅读
目的:本研究选取重楼及其单体,旨在探讨通过调控EMT,抑制结直肠癌迁移和侵袭的作用机制,阐明其对结直肠癌转移的抑制作用,为药物靶向作用于结直癌的转移提供实验支持,并为控制结直肠癌的转移提供新的思路与方法。方法:（1）培养人结直肠癌HT29和LoVo细胞株。（2）MTT法检测不同浓度的药物对HT29和LoVo细胞活力的影响,分析药物的IC50值;筛选并选取重楼最敏感单体进行后续实验。（3）平板克隆和Ed U增殖实验检测药物对细胞增殖作用的影响;Western-blotting检测药物干预后PI3K/Akt信号通路的蛋白表达。（4）Transwell检测药物对细胞迁移、侵袭的影响;Western-blotting检测药物干预后EMT相关蛋白的表达。结果:（1）人结肠癌HT29和LoVo细胞生长良好,适合进行实验操作。（2）MTT实验结果显示PPE对HT29和LoVo细胞生长具有抑制作用,并且呈浓度相关性。（3）平板克隆和Ed U增殖实验结果表明,PPE对细胞增殖有抑制作用。（4）Western-blotting检测PI3K/Akt相关蛋白表达,结果表明,PPE干预细胞后,与对照组相比,p-PI3K、p-Akt表达水平降低。（5）Transwell结果表示,PPE抑制细胞的迁移和侵袭。（6）Western-blotting检测EMT相关蛋白,结果表明,PPE干预细胞后,与对照组相比,E-cadherin表达水平增加,N-cadherin、MMP2、MMP9表达水平降低,Smad2、Smad3表达基本不变,p-Smad2、p-Smad3表达水平降低。（7）重楼内重楼皂苷Ⅰ（PPI）、重楼皂苷Ⅱ（PPII）、重楼皂苷VII（PPVII）的含量为检测重楼的质量标准,MTT结果显示PPI、PPII、PPVII对细胞活力均具有抑制作用,但PPVII对细胞活力抑制最明显,故选择PPVII进行后续实验。（8）平板克隆和Ed U增殖实验结果表明,PPVII对细胞增殖有抑制作用。（9）Western-blotting检测PI3K/Akt相关蛋白表达,结果表明,PPVII干预细胞后,与对照组相比,p-PI3K、p-Akt表达水平降低。（10）Transwell实验结果表示,PPVII抑制细胞的迁移和侵袭。（11）Western-blotting检测EMT相关蛋白,结果表明,PPVII干预细胞后,与对照组相比,E-cadherin表达水平增加,N-cadherin、MMP2、MMP9表达水平降低,Smad2、Smad3表达基本不变,p-Smad2、p-Smad3表达水平降低。结论:重楼通过体外实验研究表现出了一定的抗癌活性,其机制可能与PPVII通过调控PI3K、Akt的磷酸化水平抑制结直肠癌细胞的增殖,调控Smad2、Smad3磷酸化水平调控EMT过程,从而抑制结直肠癌细胞的迁移和侵袭,为重楼皂苷靶向治疗结直肠癌提供实验支持。
其他文献
目的:观察三甲复脉汤联合硝苯地平控释片对阴虚质老年单纯收缩期高血压患者的降压疗效及中医证候改善情况。方法:选取符合纳入标准的阴虚质老年单纯收缩期高血压（1级、2级）患者60例,随机分为治疗组（30例）和对照组（30例）。对照组予以口服硝苯地平控释片（30mg QD）,治疗组在此基础上加用三甲复脉汤（每日2次,早晚温服）。治疗4周后,将观察记录的临床数据以SPSS25.0统计学软件进行统计学分析,通
目的:基于数据挖掘技术,探究中医药治疗高血压肾病（hypertensivenephroscler osis,HNS）的临床经验,总结其临床症状、证候分布、用药规律等,为中医药防治HNS提供科学依据。方法:基于中医临床真实世界实例,以中医临床科研信息共享系统为载体,采集2016年6月至2021年8月在山东中医药大学附属医院住院高血压肾病患者的电子病例系统及医嘱系统的相关信息,建立高血压肾病人群数据库
目的:针对原发性骨质疏松症（primary osteoporosis,POP）高发病率、高患病率的特点,从中医角度出发,探究中医证型分布与脆性骨折的发生特点,为骨质疏松早预防、早治疗,远离骨质疏松性骨折提供新思路,为更好地指导中医辨证及中医药防治骨质疏松症发挥独特优势。方法:按照严格的纳排标准,在济南市机关医院、益康社区、文东社区、燕山社区、舜玉小区及本院骨质疏松门诊纳入研究对象,收集其一般情况、
目的:探讨消肿颗粒联合阿柏西普对糖尿病黄斑水肿（diabetic macular edema,DME）的防治作用。验证中药联合阿柏西普治疗DME的有效性、安全性,以及中药在提高最佳矫正视力（best corrected visual acuity,BCVA）、消除黄斑水肿的作用。方法:研究对象选取2019年12月至2021年12月期间在枣庄市中医医院行玻璃体腔注药术的糖尿病黄斑水肿患者70例（81
目的:探索中医综合疗法干预人工全膝关节置换术后恐动症防治方案;观察和比较常规术后处理、认知行为疗法和中医综合疗法干预恐动症在术后首次下床活动时间、疼痛感受、膝关节功能评分等方面的差异;评价中医综合干预新方法对膝关节早期功能康复的影响,为优化恐动症防治提供参考。方法:根据本研究纳入排除标准,选取自2021年01月至2021年12月期间因膝关节骨性关节炎于某三级甲等中医院行初次单侧人工全膝关节置换伴有
目的:通过收集原发性高血压患者的临床资料,总结其六经症状的分布规律,探讨原发性高血压的六经证型分布规律,为原发性高血压的六经辨证论治提供参考。方法:采用回顾性研究方法,收集2020年09月至2021年09月于山东中医药大学附属医院心病科门诊就诊的原发性高血压患者资料,包括一般资料（年龄、性别）和临床信息（主诉、现病史、既往史、六经症状、体格检查等）。运用六经辨证方法,得出原发性高血压患者的六经证型
目的:通过观察消癖化痰颗粒治疗痰湿内阻型非酒精性脂肪性肝炎的治疗结果,了解该药物的效果及用药安全性,为饱受非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）困扰的患者提供一种安全、有效且易于接受的中医中药治疗方案,从而延缓NAFLD的进展,稳定肝功能,减轻肝脏损害。方法:收集80名符合纳入标准的非酒精性脂肪性肝炎（痰湿内阻证）患者,随机分为试验组和对照组,每组40例,其中试验组予以消癖化痰颗粒（1日1剂,分早晚饭后
目的:通过观察祛风化痰通络汤治疗前后,风痰入络型急性小动脉闭塞型脑梗死的中医证候积分、NIHSS评分量表、Barthel指数量表的变化,评价祛风化痰通络汤的临床疗效。方法:本研究采用随机对照法。共纳入病例60例,随机分成对照组与观察组（各30例）。对照组进行西医内科基础治疗,治疗组组在此基础上加上中药“祛风化痰通络汤”口服。两周为1个疗程,观察患者治疗前后中医证候积分、NIHSS评分、Barthe
关中良好的自然环境以及丰富灿烂的历史文化,孕育了关中八景诗,关中八景诗不仅是地域景观之美的文学书写,还是地域文化的载体。本文以关中地方志以及关中历史文化典籍中收录的八景诗为研究对象,通过对关中八景诗进行审美层面的分析,一方面明确关中八景诗中的审美价值,另一方面探析蕴藏在关中八景诗中的旅游文化价值,助力关中地区旅游文化建设以及旅游业的发展。本文共分为四个章节,第一章,主要介绍孕育关中八景诗的自然地理
目的:观察活血消癥汤联合羟基脲治疗气滞血瘀型真性红细胞增多症（Polycythemia vera,PV）的临床疗效,突出中医药治疗PV的特色及优点,为临床工作提供新方法、新思路。方法:收集30例气滞血瘀型PV患者,随机分为两组,观察组（15例）、对照组（15例）。对照组给予以羟基脲为基础的方案治疗,观察组在治疗组的基础上加用活血消癥汤,治疗3个月后观察两组患者的临床疗效。结果:1.治疗后两组患者红