本研究应用康奈尔净碳水化合物净蛋白质体系的原理和方法对东北农区23种主要奶牛饲料营养成分及氨基酸组成进行分析,探讨了用其评定饲料营养价值的可能性;同时借鉴CNCPS体系中的CPM-Dairy 3 version模型对黑龙江省规模化奶牛场日均产奶量分别为20 kg和25 kg奶牛的2种日粮进行评估,从而验证CPM模型对奶牛日粮的评价效果;并选择9种不同能氮水平的日粮,探讨奶牛尿中、乳中嘌呤衍生物(PD)、肌酐含量(C)、乳中尿素氮(MUN)以及PD与C的比值的变化规律,探求一种能够特异性反映日粮营养能氮水平在奶牛体内消化吸收动态变化的代谢指标,从而为建立一种便捷、有效、可靠的奶牛营养检测新方法奠定理论基础。试验一、根据CNCPS体系提出的蛋白与碳水化合物分类方法,对东北农区23种典型奶牛饲料进行粗蛋白质(CP)、非蛋白氮(NPN)、可溶性蛋白(SCP)、酸性洗涤不溶蛋白(ADIP)、中性洗涤不溶蛋白(NDIP)及酸性洗涤纤维(ADF)、中性洗涤纤维(NDF)、木质素(ADL)和淀粉进行测定,并根据CNCPS计算出样品中的非蛋白氮(PA)、快速降解蛋白质(PB1)、结合蛋白质(PC)、中度降解蛋白质(PB2)、慢速降解蛋白质(PB3)和不可利用纤维(CC)、可利用纤维(CB2)、淀粉、果胶(CB1)和糖类(CA)。结果表明,东北农区23种奶牛常用饲料中,SCP/CP的比例以全株玉米青贮(产地:大庆)最高(68.74%),湿啤酒糟(产地:沈阳)最低(4.12%);ADL/NDF比例则以苹果渣(产地:鞍山)最高(34.51%),大麦(产地:沈阳)为最低(2.46%)。真蛋白的含量以豆粕(产地:沈阳)最高(97.07%),全株玉米青贮(产地:大庆)最低(26.81%);不可利用纤维(CC/CHO)比例则以苹果渣(产地:鞍山)最高(65.01%),玉米(产地:齐齐哈尔)最低(1.6%)。由此得出结论,CNCPS体系中的分析方法能够较全面的反映出饲料的营养价值。试验二、对东北农区奶牛常用饲料中的氨基酸含量的测定分析。结果表明,蛋氨酸(Met,%DM)含量以干啤酒糟(产地:沈阳)最高(0.32%),秸秆(产地:大庆)最低(0.06%);赖氨酸(Lys,%DM)以豆粕(产地:哈尔滨)最高(2.86%)玉米秸秆压缩饼(产地:沈阳)最低(0.28%)。Met(%CP)以秸秆(产地:大庆)最高(1.82%),苜蓿(产地:齐齐哈尔)最低(0.52%);Lys(%CP)以豆粕(产地:哈尔滨)最高(5.94%)玉米(产地:齐齐哈尔)最低(2.16%)。试验三、研究CPM模型在日粮评价和预测奶牛生产性能方面的应用效果。选择健康、胎次、体重和泌乳阶段相近的奶牛56头,分成2组,组日均产奶量分别为20和25 kg,按配对试验设计要求把试验奶牛分成对照组和试验组,对照组日粮为奶牛场配制的日粮,试验组日粮为应用CPM软件调整后的日粮,试验期为45 d。结果表明,饲喂调整后日粮的奶牛产奶量、4%标准乳产量、MUN和血浆尿素氮(BUN)含量均略高于对照组(P>0.05),试验组Ⅰ的乳脂率略高于对照组Ⅰ(P>0.05),乳蛋白率未见显著性差异;试验组Ⅱ的乳脂率、乳蛋白率则略低于对照组Ⅱ(P>0.05);调整后2种日粮成本分别比调整前降低2.43元/天和2.12元/天。利用CPM模型预测产奶量与实际产奶量的差距除了对照组Ⅰ外,其他处理组均在6%之内,预测DMI与实际DMI的差距在5%之内。由此可知,在我国规模化奶牛场应用CPM模型可以预测日粮的营养价值、并在不影响奶牛的生产性能的前提下降低饲养成本。试验四、选择健康、胎次、体重和泌乳阶段相近奶牛27头,采用3×3析因试验设计,利用CPM-Dairy 3模型设计的代谢能量、代谢蛋白质分别为需要水平的127%和123%和代谢能量、代谢蛋白质分别为需要水平的75%和80%日粮能氮梯度区间内9种不同能氮水平日粮饲喂各组奶牛,利用全收尿法研究奶牛尿中的嘌呤衍生物(UPD)、肌酐含量(UC)及UPD:UC值随日粮不同能氮水平变化的规律。结果表明,当日粮中代谢蛋白含量相同时,UPD含量随着代谢能量水平的升高而增加,而且尿酸(8.24-22.75 mmol/d)、尿囊素(49.61-137.10 mmol/d)和总UPD(57.85-159.86 mmol/d)的变化规律相同;当日粮中代谢能量相同时,UPD含量随着代谢蛋白水平升高而增加,而且尿酸、尿囊素和总UPD含量变化规律相同。通过线性回归分析,发现尿酸、尿囊素和总UPD含量与日粮中能氮水平变化呈线性关系。从尿酸、尿囊素比例来看,九种日粮中除HELP、MELP和LEMP组日粮奶牛尿中尿酸与尿囊素的比值为0.12:0.88外,其他各组日粮均为0.14:0.86。奶牛UC含量(46.70-59.16 mmol/d)并不随着日粮能氮水平变化而变化,只与奶牛的体重有关。UPD:UC比值(1.07~2.95)随着日粮能氮水平的增加而升高,并呈显著的线性关系。试验五、利用点收尿法研究奶牛尿中的嘌呤衍生物(UPD)、肌酐含量(UC)及UPD:UC比值随日粮不同能氮水平变化的规律,试验处理同试验四。结果表明,尿样中的尿酸(1.06-3.49mmol/L)、尿囊素(5.86-19.59mmol/L)及总PD(6.92-23.08mmol/L)含量的变化趋势与全收尿法的变化趋势基本一致,尿酸和尿囊素比值亦在0.15:0.85~0.17:0.83范围之间,并且奶牛尿液中尿酸、尿囊素和UPD值与日粮能氮水平呈显著的线性相关。UC的含量(7.72-13.40mmol/L)也不受日粮能氮水平变化的影响。但UPD:UC值(0.80~2.54)与日粮能氮水平呈显著的线性关系。对于UPD:UC值,全收尿法和点收尿法具有较强的相关性(r=0.8862)。由此得出结论,奶牛的UPD及UPD:UC值均能很好的反映出日粮的能氮水平。并且,点收尿法可以替代全收尿法来对UPD:UC值进行检测。利用全收尿法建立的方程分别为: y? upd = ?145.5429(26.2291)+0.9718(0.2504)x1 +1.4663(0.2799)x2 y? upd / c= ?2.3360(0.5377)+0.0190(0.0051)x1+0.0223(0.0057)x2利用点收尿法建立的方程分别为: Y?u pd = ?26.3184(4.2510)+0.1119(0.0406)x1 +0.2697(0.0454)x2 Y?u pd / c=7.6026(2.9748)?0.0837(0.0280)x1?0.0818(0.0315)x2?0.0010(0.0003)x1x2试验六、研究乳中嘌呤衍生物(MPD)、MUN、肌酐含量(MC)和MPD:MC值随日粮能氮水平变化的规律。结果表明,当日粮中代谢能量处于同一水平时,MPD的含量随代谢蛋白水平升高而增加,这与UPD的变化规律一致;当代谢蛋白含量处于同一水平时,乳中尿酸含量(0.44-1.22 mmol/L)是随着代谢能量水平升高而增加,而尿囊素的含量(0.75-1.36 mmol/L)和总MPD的含量(1.19-2.58 mmol/L)除了低蛋白水平的三个处理组外,其他处理组均随着能量水平的升高而增加,低蛋白水平三个处理组尿囊素含量依次为MELP组>HELP组>LELP组,但组间差异不显著(P>0.05),乳中尿酸和总MPD值与日粮能氮水平呈线性相关,而尿囊素不受日粮能氮水平影响。MC含量变化范围为2.77-7.27mmol/d,为全收尿中UC含量的5.93-12.28%,两者的变化趋势相似;MPD:MC值变化范围为0.27-0.53,为全收尿中UPD:UC比值的17.96-25.23%。MC含量与MPD:MC值不受日粮能氮水平变化的影响。乳尿素氮(MUN)含量可及时反映奶牛日粮瘤胃降解蛋白含量(RDP)、能量水平以及能氮平衡状况,在本试验中,饲喂不同能氮水平日粮奶牛乳中尿素氮含量变化具有一定的规律,即当奶牛日粮处于中等能量水平以上时,奶牛乳中尿素氮含量随着蛋白质水平的增加而具有增加的趋势,而在低能量水平时,饲喂LEMP组日粮MUN含量略高于饲喂LEHP组日粮奶牛MUN(P>0.05),而二者却显著高于饲喂LELP组日粮奶牛MUN含量(P<0.05)。当奶牛日粮处于中等和低蛋白质水平时,奶牛乳中尿素氮含量随着能量水平的增加而具有降低的趋势,而在高蛋白水平时,饲喂MEHP组日粮MUN含量略高于饲喂LEHP组日粮奶牛MUN含量(P>0.05),而二者却显著高于饲喂HEHP组日粮奶牛乳中MUN含量(P<0.05)。由此得出结论,根据尿及乳中的相关指标与能氮水平的相关分析,可以通过测定奶牛的UPD、UPD:UC和乳中MUN含量对奶牛日粮的营养价值进行估测。