基于三苯胺的荧光探针的合成及其在细胞成像中的应用

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比起其它生物成像方式,荧光成像成本低廉、易于操作,能够在细胞层面上提供高分辨率,高灵敏度的图像信息,是一种广泛应用于生物科学和临床医学的生物成像方法。有机荧光小分子因其种类丰富、荧光强成为目前使用较为广泛的探针材料。然而传统的有机荧光小分子在荧光成像中也存在一些缺点,如光稳定性差、细胞毒性大,导致其应用有一定局限性。因此,研究并开发新种类的,光稳定性好、荧光量子产率高、低毒性的荧光成像分子探针是很有必要的。三苯胺分子是以氮原子为中心,通过碳氮单键连接周围三个苯环。由于单键的可旋转性,分子整体呈螺旋桨结构。三苯胺的三个对位很容易发生芳环亲电取代生成三苯胺衍生物。这类基于三苯胺的荧光分子因具有荧光量子产率高,光稳定性好的特点而在物理、化学以及生物传感方面广泛应用,然而这类分子在生物成像领域尚未引起足够关注。于是,如何将这类基于三苯胺的、光学性能良好的荧光材料广泛应用到生物成像领域有非常重要的意义。于是,本论文设计合成了基于三苯胺的可以应用于细胞成像的新型荧光探针分子。论文内容分为以下两部分:1.通过Vilsmeier-Haack反应和McMurry偶联反应合成了含有两个三苯胺结构的荧光小分子TPAS。对TPAS的分子结构做了核磁、红外表征,其光物理性质通过紫外、荧光测试进行研究。研究表明,TPAS分子在稀溶液中表现出ACQ性质,而其固体却有强的蓝色荧光。且该分子光稳定性好、分散性好、尺寸小、低毒性,作为荧光探针能实现A549活细胞高灵敏度和高分辨率的成像。2.以三苯胺为原料,通过Vilsmeier-Haack反应合成化合物PDBD和NTBD,进一步通过非催化、免惰性气体保护、免溶剂干燥的羟醛缩合反应合成两种含电子给-受体(D-A)结构的荧光聚合物LP和BP。运用核磁氢谱、核磁碳谱、红外光谱表征了聚合物的结构。紫外、荧光等研究表明LP和BP都表现出良好的光物理性质,但是由于线型LP的柔性好,网状BP的刚性强,二者在溶解性、溶剂致变色效应、聚集态荧光变化的测试结果里体现出较大差异。LP因其溶解性好、有AIEE性质、低毒性、粒径尺寸适宜而作为荧光探针,在标记MPC5细胞时表现出良好的生物相容性和较高的成像分辨率。
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