结缕草再生体系的建立及诱导突变体筛选

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结缕草是一种被广泛应用的暖型草坪草,本实验所选择的青岛、兰引Ⅲ号和马尼拉结缕草,具有适应性广,抗旱性强、耐磨性和耐践踏性强等很多优良特性,生产中被广泛应用于园林景观绿化、生态恢复、水土保持等方面,但因绿期较短,抗寒性不强严重制约了其发展,所以提高其坪用性状(如矮生性,以减少草坪草的修剪;改良叶形和叶色,以提高观赏性等)、选育优质抗逆(耐寒、耐旱、耐盐碱)新品种一直是结缕草种质资源创新研究的前沿。近年来,辐射诱变组织培养复合育种技术成为了研究者们研究的热点。本实验采用组织培养技术成功建立了结缕草的再生体系,并将低温技术、电离辐射技术与组织培养技术相融合,获得了较高的胚性愈伤组织形成率,同时筛选到系列突变体材料,为培育结缕草新品种奠定了基础。所得结论主要如下:1建立再生体系的最佳条件(1)最佳外植体材料是茎基。(2)诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+2,4-D2.0mg/L。(3)继代培养最适合的培养基为MS+2,4-D(0.05mg/L)+6-BA(2.0mg/L),胚性愈伤组织形成率分别为:9.09%(QJ),15.63%(YJ),10.34%(BJ)。(4)胚性愈伤组织在MS基本培养基的分化率为100%。2低温处理的最佳温度及时间低温处理的最适处理温度为5℃,最佳处理时间为7d,获得愈伤诱导率分别为:93.33%(QJ)、94%(YJ)、90%(BJ)。胚性愈伤诱导率分别为:50%(QJ)、65.96%(YJ)、60%(BJ)。3单独进行辐照处理时,最佳剂量为20Gy,其次为15Gy,30Gy为半致死剂量。4辐照与低温复合处理(1)最佳剂量为20Gy,最佳处理模式组合为辐照前或后进行一次低温处理,经过处理后获得了较高的胚性愈伤诱导率,分别为51.72%(QJ),88.89%(YJ),83.33%(BJ)。(2)经过辐照和低温复合处理后成功筛选到叶色,株型等系列突变体株系。
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