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为了探讨葡萄糖浓度对猪小肠上皮细胞精氨酸吸收、转运的影响。本试验以仔猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)系为体外培养模型,选取生长状态良好的(IPEC-J2)细胞,待细胞融合度达到90%时,将细胞在缺乏氨基酸的EBSS平衡盐溶液和维生素混合的培养基中饥饿2h。然后向葡萄糖浓度为25mM/L,75mM/L,225mM/L的三种培养基中分别加入0mM/L、0.7mM/L、1.4mM/L、2.1mM/L、4.2mM/L精氨酸,配制成15种葡萄糖和精氨酸混合培养基,分别处理细胞20,40,80,160min,通过细胞指数、精氨酸吸收转运体基因及蛋白质表达量的测定。试验结果如下:1精氨酸及葡萄糖对细胞增殖的影响。试验结果表明,添加精氨酸、葡萄糖对细胞增殖有明显的促进作用,且二者之间存在着极显著的互作效应(P<0.01)。葡萄糖浓度一定时,随着精氨酸浓度的增加,细胞指数呈现了先升高后降低的趋势,在精氨酸浓度为1.4mM/L、2.1mM/L时对细胞增殖的促进作用较显著(P<0.05);精氨酸浓度一定时,随着葡萄糖浓度的增加,细胞指数也呈现了先升高后降低的趋势,且在葡萄糖浓度在75mM/L时,对细胞增殖有显著的促进作用(P<0.05)。2精氨酸吸收、转运载体mRNA表达的测定结果表明:葡萄糖和精氨酸浓度对精氨酸吸收、转运载体的表达均有显著影响((P<0.05),而且葡萄糖和精氨酸浓度在精氨酸吸收、转运体的mRNA表达上表现出了极显著的互作效应(P<0.01)。细胞处理40min时,葡萄糖浓度为75mM/L,精氨酸浓度为2.1mM/L,显著提高了精氨酸吸收载体b0,+AT mRNA相对表达量(P<0.05);细胞处理至80min时,葡萄糖浓度为75mM/L,精氨酸浓度为2.1m M/L,显著提高了精氨酸转运载体y+LAT1 mRNA相对表达量(P<0.05)。3根据试验2得出的结果,选取试验2中最适精氨酸吸收、转运载体mRNA相对表达量的葡萄糖浓度及时间,检测精氨酸转运载体的蛋白相对表达量。蛋白质表达水平层面的试验表明:精氨酸吸收、转运载体的蛋白相对表达量与mRNA表达量的变化规律基本一致。即处理细胞40min时,精氨酸浓度为2.1mM/L,显著提高了精氨酸吸收载体b0,+AT蛋白相对表达量(P<0.05);细胞处理至80min时,精氨酸浓度为2.1mM/L,显著提高了精氨酸转运载体y+LAT1蛋白相对表达量(P<0.05)。综上所述,葡萄糖、精氨酸浓度对仔猪小肠上皮细胞的增殖,精氨酸吸收、转运载体基因的表达均具有显著影响,而且葡萄糖和精氨酸浓度在细胞增殖以及精氨酸吸收、转运体的mRNA表达上均表现出了极显著的互作效应。本试验中葡萄糖浓度75mM/L,精氨酸浓度2.1mM/L,能够显著促进猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)吸收、转运体b0,+AT和y+LAT1的基因表达及蛋白合成。