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目的研究喉癌前病变和喉鳞状细胞癌组织细胞的抑癌基因RASSF1A的表达情况,并分析抑癌基因RASSF1A转录表达、蛋白表达与喉鳞状细胞癌变过程中临床病理因素之间的关系。方法 本实验取59例喉部病变的患者,其中9例为炎性息肉(Inflammatory polyps)作为正常对照,其余50例为喉癌变过程中不同病理时期的新鲜手术切除标本。喉癌前病变及喉癌组织标本分为喉角化症(Keratosis of the Larynx)10例、喉乳头状瘤(成人)(papilloma of the Larynx)10例、高级别上皮内瘤样变(Ⅲ级,重度不典型增生,high grade dysplasia, HGD)15例、喉鳞状细胞癌(LSCC)15例。采用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(Quantitative RT-polymerase chain reaction, RT-PCR)以及western blotting和免疫组织化学SP检测喉部炎性病变、喉角化症、喉部重度不典型增生、喉乳头状瘤及喉鳞癌状细胞组织中RASSF1A基因的mRNA转录表达以及蛋白质表达,统计RASSF1A基因表达缺失的发生率及其与临床资料相关性,明确RASSF1A基因在喉癌变过程中的重要作用。结果:在RT-PCR反应中我们发现,RASSF1A转录本在喉炎性息肉组织中均有表达;RASSF1A转录表达随着上皮异常增生程度或不典型增生的加剧,呈现逐步减弱趋势。喉息肉、喉角化症及喉乳头状瘤组相比,差异无统计学意义(P>0.05),但重度不典型增生组织与息肉、角化症及乳头状瘤组比较,差异有统计学意义(p<0.05);喉鳞状细胞癌组织与息肉、角化症及乳头状瘤组比较,差异有统计学意义(p<0.01)。RASSF1A基因Western-blot灰度分析和免疫组织化学SP法分析结果显示,RASSF1A基因蛋白在喉炎性息肉组织中均有表达,在喉癌变过程中不同病理组织有不同程度的表达。RASSF1A蛋白表达随着喉黏膜癌变程度不断地加剧,呈现逐步减弱趋势,与mRNA转录表达相似。结论:抑癌基因RASSF1A在喉癌前病变和喉鳞状细胞癌的癌变过程中表达水平呈进行性下调。RASSF1A的表达缺失可以很好地预测喉癌前病变癌变的风险性。而Real-Time RT-PCR和Western-blot法以及免疫组织化学SP法可以有效地检测出RASSF1A的表达情况。具有更准确的检测RASSF1A基因的mRNA转录表达以及蛋白质表达与异常增生程度之间的关系,以及预测癌变危险程度分子水平的一个指标,并利用免疫组化方法检测RASSF1A基因表达的相关联系,使得检测RASSF1A基因的表达具有科学依据并指导临床治疗有重要意义和应用前景。