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目的:初步探讨结直肠癌肿瘤干细胞通过激活Wnt信号通路影响端粒长度变化从而促进肿瘤进展的作用机制。 方法:本实验选取结直肠癌肿瘤干细胞表面标志物 Lgr5、Wnt信号通路的核心因子β-catenin和端粒长度调节蛋白 TRF1三个基因,采用实时荧光定量聚合酶链反应法(real time polymerase chain reaction,RT-PCR)和免疫组织化学染色法检测50例结直肠癌组织、50例癌旁组织及50例远癌切端组织中的三者的表达情况,并且统计分析 Lgr5、β-catenin及 TRF1的表达水平与患者的临床病理特征的关系。 结果: 1. Lgr5的表达情况:实时荧光定量PCR的结果显示,在结直肠癌组织中,Lgr5 mRNA的表达水平高于结直肠癌旁组织和远癌切端组织中的表达水平,差异有统计学意义(P<0.05);Lgr5 mRNA的表达水平与结直肠癌患者临床病理特征的关系显示,Lgr5 mRNA的表达水平在有淋巴结转移组高于无淋巴结转移组,有远处转移组高于无远处转移组,分期Ⅲ+Ⅳ组表达高于Ⅰ+Ⅱ组,差异有统计学意义(P<0.05),而在性别、年龄、分化程度、侵润深度等分组中无显著差异(P>0.05)。免疫组化结果显示,在结直肠癌组织中,Lgr5蛋白的表达水平高于结直肠癌旁组织和远癌切端组织中的表达水平,差异有统计学意义(P<0.05);Lgr5蛋白的表达水平与患者临床病理特征的关系显示为,Lgr5蛋白在淋巴结转移组高于无淋巴结转移组、有远处转移组高于无远处转移组、分期Ⅲ+Ⅳ组表达高于Ⅰ+Ⅱ组,差异有统计学意义(P<0.05),而在年龄、性别、分化程度、浸润深度等分组中无显著差异(P>0.05)。 2.β-catenin的表达情况:实时荧光定量PCR检测结果显示,在结直肠癌组织中β-catenin mRNA的表达水平高于结直肠癌旁组织和远癌组切端织中的表达水平,差异有统计学意义(P<0.05);β-catenin mRNA的表达水平与患者临床病理特征的关系显示,β-catenin mRNA在淋巴结转移组高于无淋巴结转移组、分期Ⅲ+Ⅳ组表达高于Ⅰ+Ⅱ组,差异有统计学意义(P<0.05),在不同的性别、年龄、分化程度、浸润深度及远处转移分组中无显著差异(P>0.05)。免疫组化结果显示,在结直肠癌组织中,β-catenin蛋白的表达水平高于结直肠癌旁组和远癌切端组织中的表达水平,差异有统计学意义(P<0.05);β-catenin蛋白的表达水平与患者临床病理特征的关系显示,β-catenin蛋白在淋巴结转移组高于无淋巴结转移组、分期Ⅲ+Ⅳ组表达高于Ⅰ+Ⅱ组,差异有统计学意义(P<0.05),在不同的性别、年龄、分化程度、侵润深度及远处转移分组中无显著差异(P>0.05)。 3.TRF1的表达情况:实时荧光定量PCR检测结果显示,在结直肠癌组织中,TRF1 mRNA的表达水平低于结直肠癌旁组织和远癌切端组织中的表达,差异有统计学意义(P<0.05);TRF1 mRNA的表达水平与患者临床病理特征的关系显示,TRF1 mRNA与性别、年龄、分化程度、浸润深度、淋巴结转移、远处转移及分期等分组无关(P>0.05)。免疫组化结果显示为,在结直肠癌组织中, TRF1蛋白的表达水平低于癌旁组和远癌切端组织中的表达,差异有统计学意义(P<0.05);TRF1蛋白的表达水平与患者临床病理特征的关系显示为,TRF1蛋白与性别、年龄、分化程度、侵润深度、淋巴结转移、远处转移及分期等分组无关(P>0.05)。 4.相关性分析:在结直肠癌组织中,Lgr5与β-catenin mRNA及蛋白表达水平成正相关(r=0.473,P<0.01; r=0.566,P<0.01);在结直肠癌组织中,β-catenin与 TRF1分别在 mRNA和蛋白表达水平呈正相关(r=0.425,P<0.01; r=0.663,P<0.01);在结直肠癌组织中,Lgr5与TRF1分别在mRNA转录水平与蛋白表达水平呈正相关(r=0.673,P<0.01; r=0.399,P<0.01)。 结论: 1.在结直肠癌中,Lgr5、β-catenin的表达水平升高,TRF1的表达水平降低,说明肿瘤干细胞、Wnt信号通路和肿瘤细胞端粒共同参与了结直肠癌的发展过程。 2.Lgr5、β-catenin及TRF1的表达存在一定的相关性,进一步证明结直肠癌中肿瘤干细胞可能通过Wnt信号通路的激活从而影响肿瘤细胞端粒长度变化。 3.通过分析Lgr5、β-catenin及TRF1的表达水平与临床病理学特征的关系,证明结直肠癌肿瘤干细胞可能通过激活 Wnt信号通路,促进结直肠癌的转移。Lgr5、β-catenin的表达水平升高与结直肠癌转移有一定相关性,可作为临床检测方法。