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目的:通过观察加味阳和汤含药血清对乳腺癌MCF-7细胞增殖、细胞周期、凋亡以及PI3K/Akt信号通路相关基因和蛋白表达的影响。初步探讨其干预PI3K/Akt信号通路及抗侵袭转移的分子机制,为进一步探讨温阳化痰法治疗乳腺癌的具体分子机制,拓宽其应用空间奠定研究基础。方法:不同剂量加味阳和汤含药血清干预乳腺癌MCF-7细胞。○1观察细胞生长状态及细胞形态的改变;○2 MTT法检测细胞增殖;○3流式细胞术测定细胞周期及细胞凋亡;○4划痕法及Transwell小室法检测细胞侵袭能力;○5 RT-PCR法测定PI3K、Akt、caspase-3、cyclinD1、Bcl-2及BaxmRNA的表达水平;○6 Western Blot法测定PI3K、Akt、p-Akt、MMP-2、TIMP-2蛋白的表达。结果:①倒置显微镜下可见,经加味阳和汤含药血清干预后细胞发生不同程度的形态学改变。② MTT法结果显示,加味阳和汤含药血清可抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖。③ FCM测定细胞周期结果显示,加味阳和汤含药血清作用于乳腺癌MCF-7细胞48h后,各剂量组G0/G1期细胞DNA含量显著升高（P<0.05）,S期细胞DNA含量均显著降低（P<0.05）G2/M期细胞DNA含量显著升高（P<0.05）;流式细胞凋亡结果显示,加味阳和汤含药血清作用于乳腺癌MCF-7细胞,早期凋亡率和晚期凋亡率均高于空白对照组（P<0.05）。④侵袭试验结果显示,空白对照组乳腺癌MCF-7细胞过膜较多,体外侵袭能力强;加味阳和汤含药血清干预后,对细胞体外侵袭有明显抑制作用。⑤ RT-PCR结果显示,与空白对照组比较,各剂量组细胞PI3K、Akt、caspase-3及BaxmRNA表达均明显增高（P<0.05）;相反,Bcl-2、CyclinD1mRNA表达量降低,各剂量组间具有显著性差异（P<0.05）。⑥ Western blot结果显示,不同剂量的加味阳和汤含药血清作用于乳腺癌MCF-7细胞24h后,Akt的表达量无显著变化。随着药物浓度的增加,P13K、P-Akt的表达量均有下降,对条带的灰度值进行统计学分析,与空白组比较均有显著差异（P<0.05）,其中高剂量组的PI3K、P-Akt含量与中剂量组比较有显著降低（P<0.05）;同时,各剂量组可明显下调MMP-2蛋白的表达（P<0.05）,上调TIMP-2蛋白的表达（P<0.05）。结论:①加味阳和汤含药血清能够抑制乳腺癌MCF-7细胞的生长活性,使其发生不同程度的形态学改变;②加味阳和汤含药血清能够诱导乳腺癌MCF-7细胞发生不同程度的凋亡,其机制与调节bcl-2/bax比值,激活caspase-3的表达有关;③加味阳和汤含药血清可影响MCF-7细胞周期,并通过降低CyclinD1的入核,从而将细胞周期阻滞于S期;④加味阳和汤含药血清能抑制乳腺癌MCF-7细胞侵袭能力,并可通过调控MMP-2/TIMP-2平衡达到其抗侵袭转移的作用。⑤加味阳和汤含药血清抗乳腺癌的机制之一可能是通过调节PI3K/Akt信号通路及下游相关因子的表达,从抑制增殖、影响细胞周期、促进凋亡抗侵袭转移能力多途径实现的。