从细胞凋亡途径探讨益气除痰方对Caspase级联反应相关蛋白表达的影响

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背景:世界卫生组织在2014年公布癌症成为全球最大的致死原因,而肺癌是当前全球大中城市发病率和死亡率最高的恶性肿瘤。肺癌现有的治疗手段有手术、放疗、化疗和分子靶向治疗,疗效仍不尽人意,患者生存期无明显突破。中药益气除痰方是国家级重点专科广州中医药大学附一院肿瘤科常用的治疗脾虚痰湿型肺癌的基本方,经过长期临床实践,其在治疗中晚期肺癌中显现优势。  目的:通过测量肺癌 A549小鼠肿瘤组织的体积、重量,肺组织转移灶,并检测肺癌A549肿瘤组织中半胱天冬酶4(Caspase-4)、DNA依赖蛋白激酶(DNA-PK)、半胱天冬酶6(Caspase-6)、核纤层蛋白B1(Lamin-B1)的表达水平,研究益气除痰方抑制肺癌的机制,为益气除痰方临床使用提供依据。  方法:建立40只肺癌A549裸鼠皮下移植瘤模型,于接种第7天将小鼠随机分为模型组(生理盐水组)、顺铂注射液组(0.002 g/kg)、益气除痰方低、高剂量组(3.0,6.0 g/kg)、益气除痰方(3.0 g/kg)加顺铂注射液组(0.002 g/kg),每组8只,中药灌胃,每天1次,连用21天。顺铂注射液腹腔注射,每天1次,连用7天。接种第29天,处死所有小鼠,测量瘤体重量、体积,并采用免疫组织化学法、RT-PCR法和免疫印迹法(western blot)检测肿瘤组织中Caspase-4、DNA-PK的表达,免疫组织化学法和RT-PCR法检测肿瘤组织中Caspase-6、Lamin-B1的表达。  结果:益气除痰方高剂量组、联合用药组肿瘤体积、肿瘤重量、肺组织转移灶明显下降,免疫组织化学法、RT-PCR法及western blot法检测结果显示肿瘤组织中Caspase-4、DNA-PK的表达均升高,与模型组比较,差异有显著性(P<0.01);联合用药组与顺铂注射液组比较,差异有显著性(P<0.05)。免疫组织化学法及RT-PCR法检测结果显示肿瘤组织中Caspase-6、Lamin-B1的表达均降低,与模型组比较,差异有显著性(P<0.01);联合用药组与顺铂注射液组比较,差异有显著性(P<0.05)。  结论:益气除痰方能降低肿瘤体积、重量、肺转移灶,升高肿瘤组织中Caspase-4、DNA-PK表达,降低Caspase-6、Lamin-B1表达,从而诱导细胞凋亡,达到治疗目的。
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