斑马鱼基因sema4c的克隆、表达和功能研究

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Sema4C是一种信号素家族跨膜型蛋白,已证实跟神经轴突导向,肌管形成有关。在前期的研究中,体外证实Sema4C促进内皮细胞运动和成管,但它在体内的功能还不清楚。   为探讨Sema4C在体内的功能,我们利用斑马鱼这一理想的模式生物,从Sema4C在斑马鱼血管和淋巴管发育中作用入手。在此研究中,从斑马鱼基因数据库中比对出了斑马鱼的Sema4C基因,命名为zSema4C。通过序列分析,蛋白比对和同源性分析表明zSema4C是人类Sema4C基因的直向同源基因,并且它们在进化过程中高度保守。采用全胚胎原位杂交技术揭示zSema4C在斑马鱼胚胎早期发育过程中的时空表达谱,证实zSema4C为一母系来源的基因,可能为胚胎早期发育所必须。zSema4C从胚胎单细胞期开始表达,24小时特异性的表达于血管区。这一表达模式跟ZFLT4,ZVEGFC的时空表达谱极其相似。通过反义吗啉环寡聚核苷酸抑制zSema4C蛋白后,在高剂量作用下,几乎全部的胚胎都出现了血管发育障碍,表现为分支血管发育缺陷;在低剂量作用下,有30%的胚胎出现淋巴管发育障碍,表现为胸导管的缺如。   血管和淋巴管的形成跟肿瘤的转移密切相关,我们首次在体内证实了zSema4C在斑马鱼血管和淋巴管发育中的重要作用,可能会成为临床抗肿瘤治疗的一个新的靶点。
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